生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)教程(徐丹丹)
全書分為基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)、綜合實(shí)驗(yàn)和附錄三個(gè)部分。共38個(gè)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,包括糖類的檢測(cè)和分析、脂類的提取和檢測(cè)、蛋白質(zhì)的分離制備與檢測(cè)分析、核酸的分離提取及檢測(cè)、酶的性質(zhì)研究及活力測(cè)定、維生素含量檢測(cè)等。附錄部分包含了生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用的基本實(shí)驗(yàn)操作方法,常用儀器使用方法和一些常見試劑的配制參考。另外還加入了與實(shí)驗(yàn)內(nèi)容相對(duì)應(yīng)的習(xí)題集,并附有參考答案。部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果中加入了圖片資料,供實(shí)驗(yàn)中參考。
本書適合作為普通高等院校各類理工科專業(yè)的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)課教材或參考書。
內(nèi)江師范學(xué)院講師,講授課程主要包括《生物化學(xué)》《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》和《分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》等課程。主要從事動(dòng)物生理生化、分子生物學(xué)相關(guān)教學(xué)和科研工作;參研了多項(xiàng)國(guó) 家 級(jí)和省部級(jí)項(xiàng)目,主持了6項(xiàng)縱、橫向課題(其中生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革項(xiàng)目2項(xiàng))。先后在《PLOS one》《Mitochondrial DNA Part B》《水產(chǎn)學(xué)報(bào)》《水生生物學(xué)報(bào)》《長(zhǎng)江流域資源與環(huán)境》和《淡水漁業(yè)》等期刊上公開發(fā)表論文近10余篇,其中第 一作者或通訊作者論文8篇(SCI 論文2篇);成功申請(qǐng)實(shí)用新型專利2項(xiàng),近3年來(lái),指導(dǎo)本科生成功申報(bào)大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)項(xiàng)目2項(xiàng)(國(guó) 家 級(jí)1項(xiàng),省級(jí)1項(xiàng)),指導(dǎo)學(xué)生榮獲2018年“創(chuàng)青春四川青年創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)大賽”銅獎(jiǎng)1項(xiàng)。
第一篇基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)/1
實(shí)驗(yàn)一糖類的顏色反應(yīng)1
一、α-萘酚反應(yīng)(Molisch反應(yīng))1
二、間苯二酚反應(yīng)(Seliwanoff反應(yīng))3
實(shí)驗(yàn)二糖類的還原作用5
實(shí)驗(yàn)三蒽酮比色法測(cè)定總糖含量8
實(shí)驗(yàn)四還原糖的測(cè)定——3,5-二硝基水楊酸比色法11
實(shí)驗(yàn)五鄰甲苯胺法測(cè)定血糖14
糖類習(xí)題集16
實(shí)驗(yàn)六脂肪的粗提和定量測(cè)定18
實(shí)驗(yàn)七脂肪碘值的測(cè)定20
實(shí)驗(yàn)八脂肪的組成23
實(shí)驗(yàn)九卵磷脂的提取和鑒定26
實(shí)驗(yàn)十血清膽固醇的定量測(cè)定(醋酸酐法)28
脂類習(xí)題集30
實(shí)驗(yàn)十一蛋白質(zhì)的性質(zhì)實(shí)驗(yàn)——蛋白質(zhì)及氨基酸的呈色反應(yīng)32
一、雙縮脲反應(yīng)32
二、茚三酮反應(yīng)34
三、黃色反應(yīng)36
四、考馬斯亮藍(lán)反應(yīng)38
實(shí)驗(yàn)十二蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的測(cè)定和蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)40
一、蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的測(cè)定40
二、蛋白質(zhì)的沉淀與變性42
三、尿蛋白定性檢驗(yàn)46
實(shí)驗(yàn)十三酪蛋白的提取49
實(shí)驗(yàn)十四考馬斯亮藍(lán)G-250法(Bradford法)測(cè)定蛋白質(zhì)的濃度51
實(shí)驗(yàn)十五蛋白質(zhì)含量測(cè)定——微量凱氏定氮法54
實(shí)驗(yàn)十六雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)含量59
實(shí)驗(yàn)十七福林-酚試劑法(Lowry法)測(cè)定蛋白質(zhì)61
實(shí)驗(yàn)十八血清蛋白質(zhì)乙酸纖維素薄膜電泳63
實(shí)驗(yàn)十九垂直板聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)67
實(shí)驗(yàn)二十SDS-PAGE電泳測(cè)定蛋白質(zhì)分子量69
實(shí)驗(yàn)二十一蛋白質(zhì)DNS分析法(DNS-Cl膜色譜技術(shù))73
蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能習(xí)題集75
實(shí)驗(yàn)二十二哺乳動(dòng)物基因組DNA的提取78
實(shí)驗(yàn)二十三植物基因組DNA的提取81
實(shí)驗(yàn)二十四應(yīng)用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA分子84
實(shí)驗(yàn)二十五DNA的瓊脂糖凝膠電泳87
實(shí)驗(yàn)二十六酵母RNA的分離與組分鑒定91
核酸的結(jié)構(gòu)與功能習(xí)題集93
實(shí)驗(yàn)二十七酶的特性96
一、溫度對(duì)酶活力的影響96
二、pH對(duì)酶活力的影響98
三、唾液淀粉酶的活化和抑制100
四、酶的專一性102
實(shí)驗(yàn)二十八肝臟中轉(zhuǎn)氨酶活力的測(cè)定106
實(shí)驗(yàn)二十九過(guò)氧化氫酶和過(guò)氧化物酶的作用109
實(shí)驗(yàn)三十堿性磷酸酶的分離與純化112
酶類習(xí)題集114
實(shí)驗(yàn)三十一維生素C的定量測(cè)定——2,4-二硝基苯肼法119
實(shí)驗(yàn)三十二維生素A的定性測(cè)定123
實(shí)驗(yàn)三十三維生素B1的定性測(cè)定125
實(shí)驗(yàn)三十四胡蘿卜素的定量測(cè)定127
維生素習(xí)題集129
第二篇綜合實(shí)驗(yàn)/131
實(shí)驗(yàn)三十五小麥萌發(fā)前后淀粉酶活力的比較131
實(shí)驗(yàn)三十六酵母蔗糖酶的提取、純化及效果分析135
實(shí)驗(yàn)三十七脲酶的分離純化及酶學(xué)特性研究139
實(shí)驗(yàn)三十八大腸埃希菌質(zhì)粒DNA的提取、酶切和瓊脂糖凝膠電泳鑒定154
附錄/159
一、實(shí)驗(yàn)室基本操作159
(一)玻璃儀器的洗滌159
(二)一些常用的清洗液159
(三)溶液的混勻160
二、常用儀器的使用和注意事項(xiàng)161
(一)移液器161
(二)電子天平162
(三)離心機(jī)163
(四)酸度計(jì)164
(五)紫外分光光度計(jì)166
三、試劑的配制及其分級(jí)168
(一)試劑配制的注意事項(xiàng)168
(二)幾種常用緩沖液的配制169
(三)常用酸堿指示劑174
四、習(xí)題參考答案176