現(xiàn)代生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教程(陳傳紅)
本書涵蓋了當(dāng)今生物化學(xué)研究中常用的技術(shù)與方法，側(cè)重于對(duì)學(xué)生基本實(shí)驗(yàn)方法和技能的訓(xùn)練，并對(duì)現(xiàn)代生物化學(xué)分析技術(shù)如離心分離、電泳、光譜分析、色譜和PCR等技術(shù)的基本原理進(jìn)行了簡(jiǎn)要介紹。全書涵蓋了生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)、現(xiàn)代生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)和現(xiàn)代生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，最后附錄中收有緩沖液配制、部分常用生化儀器操作規(guī)程與注意事項(xiàng)等內(nèi)容�，F(xiàn)代生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)部分涉及的55個(gè)實(shí)驗(yàn)分屬四大類：基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)（含22個(gè)實(shí)驗(yàn)）、綜合性實(shí)驗(yàn)（含21個(gè)實(shí)驗(yàn)）、設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)（含6個(gè)實(shí)驗(yàn)）和雙語(yǔ)教學(xué)選開實(shí)驗(yàn)（含6個(gè)實(shí)驗(yàn)）。實(shí)現(xiàn)了生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教材在基礎(chǔ)性、綜合性、創(chuàng)新設(shè)計(jì)性以及雙語(yǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)多方面的全覆蓋，同時(shí)在綜合性實(shí)驗(yàn)中包含了7個(gè)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，突出了分子生物學(xué)與生物化學(xué)之間的學(xué)科交叉性。
本書內(nèi)容全面，可操作性強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好，可作為高等學(xué)院校生物科學(xué)、生物技術(shù)、生物工程以及食品、環(huán)境、農(nóng)學(xué)、林學(xué)、化學(xué)類等專業(yè)的生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教材，也可供相關(guān)教師和科研人員參考。
陳傳紅，東華理工大學(xué)化學(xué)生物與材料科學(xué)學(xué)院生物系主任，副教授，碩士生導(dǎo)師，2015年以來(lái)?yè)?dān)任專業(yè)學(xué)位教育碩士學(xué)科教學(xué)（生物）方向負(fù)責(zé)人，江西省生態(tài)學(xué)會(huì)理事。
先后主持完成國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目 1項(xiàng)、江西省自然科學(xué)基金項(xiàng)目 1項(xiàng)、省教育廳科學(xué)研究項(xiàng)目1項(xiàng)，教育部教學(xué)改革項(xiàng)目1項(xiàng)、江西省教學(xué)改革研究課題1 項(xiàng)、江西省專業(yè)學(xué)位委員會(huì)研究生教學(xué)改革項(xiàng)目1項(xiàng)、教學(xué)案例庫(kù)建設(shè)項(xiàng)目1項(xiàng)；參與完成省部級(jí)科研項(xiàng)目11項(xiàng)，其中科技部“水專項(xiàng)”重大項(xiàng)目2項(xiàng)；主持與參與完成省級(jí)精品課程各1門，參與出版教材（專著）3部；公開發(fā)表研究論文40余篇（其中SCI 8篇）；2007年獲得江西省科技進(jìn)步獎(jiǎng)三等獎(jiǎng)、2006年撫州市科學(xué)技術(shù)獎(jiǎng)一等獎(jiǎng)，獲得江西省高等學(xué)�？萍汲晒�(jiǎng)二等獎(jiǎng)；2010年獲得江西省教育科學(xué)優(yōu)秀成果獎(jiǎng)三等獎(jiǎng)。長(zhǎng)期擔(dān)任本科生物化學(xué)等課程教學(xué)工作。
第一章 生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí) 001
第一節(jié) 生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)發(fā)展概況 001
第二節(jié) 生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室常識(shí)介紹 003
一、實(shí)驗(yàn)室規(guī)則 003
二、實(shí)驗(yàn)記錄與實(shí)驗(yàn)報(bào)告 004
三、實(shí)驗(yàn)室安全措施及注意事項(xiàng) 005
四、實(shí)驗(yàn)室基本操作 007
五、試劑的分級(jí)和特殊試劑的保存 012
第二章 現(xiàn)代生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù) 013
第一節(jié) 離心分離技術(shù) 013
一、離心力的計(jì)算 013
二、沉降速度 013
三、沉降系數(shù) 014
四、沉降時(shí)間 015
五、離心分離的方法 015
六、離心機(jī)的類型及使用 016
七、安全措施 017
第二節(jié) 電泳技術(shù) 017
一、電泳的基本原理 017
二、區(qū)帶電泳的分類 019
三、電泳技術(shù)的應(yīng)用 020
第三節(jié) 分光光度技術(shù) 026
一、溶液的顏色與光吸收的關(guān)系 026
二、吸光度與透光度 026
三、Lambert-Beer定律 027
四、偏離Lambert-Beer定律的產(chǎn)生因素 027
五、可見光及紫外光分光光度法 027
六、分光光度計(jì) 028
第四節(jié) 色譜技術(shù) 029
一、色譜技術(shù)的基本理論 029
二、吸附色譜 031
三、分配色譜 035
四、離子交換色譜 036
五、凝膠色譜法 039
六、親和色譜 042
第五節(jié) 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù) 044
一、PCR反應(yīng)的基本原理 044
二、PCR反應(yīng)的基本步驟 046
三、PCR技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用 046
第三章 基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn) 049
第一節(jié) 糖生物化學(xué)實(shí)驗(yàn) 049
實(shí)驗(yàn)一 糖的還原性檢驗(yàn) 049
實(shí)驗(yàn)二 總糖和還原糖的測(cè)定 051
Ⅰ Fehling試劑熱滴定法 051
Ⅱ 3, 5-二硝基水楊酸比色定糖法測(cè)定還原糖和總糖 054
第二節(jié) 脂類化學(xué)實(shí)驗(yàn) 057
實(shí)驗(yàn)一 脂肪碘值的測(cè)定 057
實(shí)驗(yàn)二 粗脂肪含量的測(cè)定—索氏抽提法 060
第三節(jié) 蛋白質(zhì)化學(xué)實(shí)驗(yàn) 062
實(shí)驗(yàn)一 蛋白質(zhì)的呈色反應(yīng)和沉淀反應(yīng) 062
Ⅰ 蛋白質(zhì)（多肽）的呈色反應(yīng)（雙縮脲反應(yīng)） 062
Ⅱ 蛋白質(zhì)的呈色反應(yīng)（茚三酮反應(yīng)） 063
Ⅲ 蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng) 065
實(shí)驗(yàn)二 蛋白質(zhì)含量測(cè)定 067
Ⅰ 紫外吸收法測(cè)定蛋白質(zhì)含量 067
Ⅱ 考馬斯亮藍(lán)染色法測(cè)定蛋白質(zhì)含量 068
Ⅲ 雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度 070
Ⅳ Folin-酚試劑法（Lowry法）測(cè)定蛋白質(zhì)含量 072
實(shí)驗(yàn)三 牛乳中蛋白質(zhì)的分離和提取 074
實(shí)驗(yàn)四 氨基酸的分離鑒定（紙色譜法） 076
實(shí)驗(yàn)五 血清蛋白的醋酸纖維薄膜電泳 077
第四節(jié) 核酸化學(xué)實(shí)驗(yàn) 080
實(shí)驗(yàn)一 核酸含量的測(cè)定 080
Ⅰ 紫外分光光度法測(cè)定核酸的含量 080
Ⅱ 二苯胺法測(cè)定DNA含量 082
實(shí)驗(yàn)二 酵母核糖核酸的分離及組分鑒定 083
實(shí)驗(yàn)三 三種腺苷酸的分離 085
Ⅰ DEAE-纖維素薄層色譜分離鑒定AMP、ADP和ATP 085
Ⅱ 醋酸纖維素薄膜電泳分離鑒定三種腺苷酸 088
第五節(jié) 酶學(xué)實(shí)驗(yàn) 090
實(shí)驗(yàn)一 酶的特性—底物專一性 090
第六節(jié) 維生素實(shí)驗(yàn) 092
實(shí)驗(yàn)一 維生素A的含量測(cè)定（比色法） 092
第四章 綜合性實(shí)驗(yàn) 095
第一節(jié) 糖化學(xué)實(shí)驗(yàn) 095
實(shí)驗(yàn)一 天然產(chǎn)物中多糖的分離、純化與鑒定 095
Ⅰ 多糖的提取、純化 095
Ⅱ 多糖的鑒定 097
第二節(jié) 蛋白質(zhì)化學(xué)實(shí)驗(yàn) 099
實(shí)驗(yàn)一 總氮量的測(cè)定（微量凱氏定氮法） 099
實(shí)驗(yàn)二 聚丙烯酰胺凝膠電泳分離血清蛋白 105
第三節(jié) 核酸化學(xué)實(shí)驗(yàn) 109
實(shí)驗(yàn)一 動(dòng)物肝臟DNA的提取及含量測(cè)定 109
實(shí)驗(yàn)二 DNA的定量測(cè)定（二苯胺法） 111
第四節(jié) 酶學(xué)實(shí)驗(yàn) 112
實(shí)驗(yàn)一 大蒜細(xì)胞SOD的提取與分離 112
實(shí)驗(yàn)二 過(guò)氧化物酶活力的測(cè)定 114
實(shí)驗(yàn)三 乳酸脫氫酶活力測(cè)定 116
實(shí)驗(yàn)四 小麥萌發(fā)前后淀粉酶活力的比較 118
實(shí)驗(yàn)五 胰蛋白酶的制備及酶活力的測(cè)定 121
實(shí)驗(yàn)六 蛋白水解酶活力的測(cè)定 125
第五節(jié) 新陳代謝實(shí)驗(yàn) 129
實(shí)驗(yàn)一 肌糖原的酵解作用 129
實(shí)驗(yàn)二 脂肪酸β-氧化 132
第六節(jié) 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn) 134
實(shí)驗(yàn)一 生物基因組DNA的提取 134
實(shí)驗(yàn)二 生物基因組DNA的檢測(cè) 137
實(shí)驗(yàn)三 質(zhì)粒DNA的提取 138
實(shí)驗(yàn)四 DNA的PCR擴(kuò)增 140
實(shí)驗(yàn)五 DNA瓊脂糖凝膠電泳 143
實(shí)驗(yàn)六 從瓊脂糖凝膠中回收DNA片段 145
實(shí)驗(yàn)七 限制性核酸內(nèi)切酶消化、連接與TA克隆 147
第五章 設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn) 151
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)一 植物總黃酮的提取和測(cè)定 152
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)二 堿性過(guò)硫酸鉀氧化—紫外分光光度法測(cè)總氮 153
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)三 酶促反應(yīng)的影響因素 153
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)四 核酸的提取及性質(zhì)鑒定 154
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)五 果蔬維生素C的定量測(cè)定 155
實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)六 水中常見細(xì)菌的快速生化檢測(cè) 155
第六章 雙語(yǔ)教學(xué)選開實(shí)驗(yàn) 157
Experiment 1 Kit for assaying blood glucose (for hand and automatic analyzer) 157
Experiment 2 Determination of isoelectric point of protein—precipitation method 159
Experiment 3 Experiments of enzyme kinetics 161
Ⅰ. Effects of substrates concentration of enzyme activity: determination of Km of alkaline phosphatase 161
Ⅱ. Effects of inhibitors on the velocities of enzymatic reactions: effect of phosphate on alkaline phosphatase 164
Ⅲ. Effects of pH value on the velocities of enzymatic reactions 165
Ⅳ. Effects of temperature on the velocities of enzymatic reactions 167
附錄 169
附錄一 生物化學(xué)常用緩沖液的配制方法 169
附錄二 分子生物學(xué)常用試劑、緩沖液的配制方法 175
附錄三 實(shí)驗(yàn)室中常用酸堿的相對(duì)密度和濃度 181
附錄四 部分生化與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器的操作規(guī)程 181
附錄五 常用生化與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)儀器的使用注意事項(xiàng) 183
參考文獻(xiàn) 189
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