《植物分子生物學技術(shù)及其應(yīng)用》簡明扼要地闡述了植物分子生物學基本原理及其相關(guān)的科研技術(shù),主要包括兩部分:一部分基礎(chǔ)篇,共21個實驗,包括實驗室常用分子生物學實驗技術(shù)(如DNA提取、瓊脂糖電泳等),以及分子生物學的一些基礎(chǔ)性實驗;第二部分應(yīng)用篇,共5個實驗,以基礎(chǔ)篇的實驗操作為基礎(chǔ),結(jié)合編者近10余年的研究報道,綜合利用多種實驗技術(shù),對某一生物學現(xiàn)象進行深入研究和探討。此外,還附有實驗室一般溶液的配制、組織和細胞培養(yǎng)常用培養(yǎng)基的配制以及實驗過程應(yīng)當注意的細節(jié)。
前言
基礎(chǔ)篇
實驗一 植物DNA的提取及凝膠電泳分析
實驗二 質(zhì)粒DNA的制備和純化
實驗三 植物總RNA的提取
實驗四 植物mRNA的分離與純化
實驗五 DNA電泳技術(shù)
實驗六 從瓊脂糖凝膠中分離回收DNA(PCR產(chǎn)物)
實驗七 質(zhì)粒DNA的限制性核酸內(nèi)切酶酶切
實驗八 大腸桿菌感受態(tài)細胞的制備及轉(zhuǎn)化
實驗九 DNA的連接
實驗十 DNA重組
實驗十一 Southern Blot分子雜交
實驗十二 Northern Blot分子雜交
實驗十三 聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)技術(shù)體外擴增DNA
實驗十四 反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)
實驗十五 實時熒光定量PCR技術(shù)
實驗十六 SSR標記技術(shù)
實驗十七 植物總蛋白質(zhì)的提取
實驗十八 SDS-PAGE測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量
實驗十九 Western Blot雜交技術(shù)
實驗二十 擬南芥轉(zhuǎn)基因株系的制備(花芽轉(zhuǎn)化法)
實驗二十一 RNA干擾
應(yīng)用篇
實驗二十二 轉(zhuǎn)基因與常規(guī)雜交相結(jié)合改良植物耐性(以耐鹽水稻為例)
實驗二十三 圖位克隆技術(shù)
實驗二十四 水稻鉀相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄組分析
實驗二十五 表達載體(Ti質(zhì)粒)的構(gòu)建及遺傳轉(zhuǎn)化
實驗二十六 基因*瞬時轉(zhuǎn)化及蛋白質(zhì)亞細胞定位的觀察技術(shù)