《生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)(生命科學(xué)核心課程系列教材)》(作者曹軍衛(wèi))包括基因工程、蛋白質(zhì)工程、細(xì)胞工程、發(fā)酵工程、免疫學(xué)方面最新的、應(yīng)用最廣泛的實(shí)驗(yàn)技術(shù),共65個(gè)相關(guān)實(shí)驗(yàn)。各實(shí)驗(yàn)的組織結(jié)構(gòu)均包括實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?shí)驗(yàn)原理、器材、操作步驟、結(jié)果及思考題,并加強(qiáng)了各實(shí)驗(yàn)的安全提示。本書力求能夠體現(xiàn)目前最新的技術(shù)方法,并且語言簡潔、流暢,條理性和可操作性強(qiáng)。
《生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)(生命科學(xué)核心課程系列教材)》適合作為微生物學(xué)、微生物工程、生物工程、 生物技術(shù)、發(fā)酵工程、 食品、生物醫(yī)學(xué)工程等相關(guān)專業(yè)的生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)教學(xué)用書,也可用于生物、醫(yī)學(xué)和農(nóng)學(xué)類應(yīng)用性學(xué)科的相關(guān)專業(yè)實(shí)驗(yàn)課程教 學(xué)。
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生物技術(shù)專業(yè)以往使用的實(shí)驗(yàn)講義不利于學(xué)生的學(xué)習(xí)與參考。因此,編者組織武漢大學(xué)知名教授與武漢東湖學(xué)院生物技術(shù)專業(yè)教師共同編寫生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)教材,希望借此為實(shí)現(xiàn)本專業(yè)人才培養(yǎng)目標(biāo)做出貢獻(xiàn)。這是國內(nèi)第一部由211、985工程大學(xué)與民營大學(xué)合作出版的本科生專業(yè)課程教材,將會(huì)對(duì)全國各類大學(xué)的生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)課程有一定的參考價(jià)值。 《生物技術(shù)綜合實(shí)驗(yàn)(生命科學(xué)核心課程系列教材)》(作者曹軍衛(wèi))包括基因工程、蛋白質(zhì)工程、細(xì)胞工程、發(fā)酵工程、免疫學(xué)方面的最新的、應(yīng)用最廣泛的實(shí)驗(yàn)技術(shù),共有65個(gè)相關(guān)實(shí)驗(yàn)。編者希望借此實(shí)驗(yàn)教材的編寫,帶動(dòng)該實(shí)驗(yàn)課程乃至整個(gè)專業(yè)的建設(shè)與改革。
目 錄
前言
第1篇 基因工程
第1章 基因工程常用技術(shù) 2
實(shí)驗(yàn)1染色體DNA的制備——植物總DNA的提取 3
實(shí)驗(yàn)2細(xì)菌總DNA的提取 5
實(shí)驗(yàn)3動(dòng)物組織DNA的提取 7
實(shí)驗(yàn)4質(zhì)粒DNA的提取 8
實(shí)驗(yàn)5瓊脂糖凝膠電泳分離檢測(cè)DNA 12
實(shí)驗(yàn)6 PCR擴(kuò)增目的基兇 15
實(shí)驗(yàn)7瓊脂糖凝膠中I)NA片段的回收 19
實(shí)驗(yàn)8 D}JA的酶切 22
實(shí)驗(yàn)9感受態(tài)細(xì)胞的制備 26
實(shí)驗(yàn)10在質(zhì)粒載體巾進(jìn)行外源DNA的克隆 29
實(shí)驗(yàn)11質(zhì)粒DNA的轉(zhuǎn)化 31
實(shí)驗(yàn)12基兇定位 34
實(shí)驗(yàn)13基岡的定點(diǎn)突變 37
實(shí)驗(yàn)14 DNA的隨機(jī)突變 40
第2章 原核表達(dá)體系的應(yīng)用 43
實(shí)驗(yàn)15原核生物巾外源基兇的表達(dá)和純化 43
實(shí)驗(yàn)16宏基岡組文庫構(gòu)建 47
實(shí)驗(yàn)17 cDNA文庫的構(gòu)建 52
第3章 真核表達(dá)體系的應(yīng)用 66
實(shí)驗(yàn)18小鼠p actin基兇的克隆與表達(dá) 66
實(shí)驗(yàn)19酵母表達(dá)體系及酵母雙雜交技術(shù) 76
實(shí)驗(yàn)20植物表達(dá)體系 84
第2篇 蛋白質(zhì)工程
第4章 蛋白質(zhì)工程常用技術(shù) 95
實(shí)驗(yàn)21蛋白質(zhì)末端分析 95
賓驗(yàn)22 SDS_PA(;E電泳分離檢測(cè)蛋白質(zhì) 100
實(shí)驗(yàn)23離子交換層析純化牛奶巾的酪蛋白 106
實(shí)驗(yàn)24凝膠過濾 115
實(shí)驗(yàn)25親和層析 124
實(shí)驗(yàn)26高效液相色譜法測(cè)定牛乳中乳白蛋白 127
實(shí)驗(yàn)27氣相色譜法測(cè)定人白蛋白制品巾辛酸鈉含量 135
實(shí)驗(yàn)28蛋白質(zhì)二維凝膠電泳技術(shù) 139
實(shí)驗(yàn)29免疫印跡 149
第3篇 細(xì)胞工程
第5章 細(xì)胞工程技術(shù) 156
實(shí)驗(yàn)30菊花的愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng) 156
實(shí)驗(yàn)31菊花愈傷組織的分化培養(yǎng) 165
實(shí)驗(yàn)32菊化苗的生根培養(yǎng) 168
實(shí)驗(yàn)33植物原生質(zhì)體分離與融合 169
實(shí)驗(yàn)34動(dòng)物細(xì)胞的原代培養(yǎng) 176
實(shí)驗(yàn)35動(dòng)物細(xì)胞的傳代培養(yǎng) 182
實(shí)驗(yàn)36培養(yǎng)細(xì)胞的增殖及活力檢測(cè) 183
實(shí)驗(yàn)37流式細(xì)胞儀檢測(cè)技術(shù) 187
第4篇 發(fā)酵工程
第6章 固體培養(yǎng)技術(shù) 192
實(shí)驗(yàn)38平菇的同體培養(yǎng)技術(shù) 192
第7章 厭氧發(fā)酵技術(shù) 197
實(shí)驗(yàn)39啤酒發(fā)酵技術(shù) 197
實(shí)驗(yàn)40酸奶發(fā)酵 205
第8章 好氧分批發(fā)酵技術(shù) 213
實(shí)驗(yàn)41單細(xì)胞蛋白好氧分批發(fā)酵技術(shù) 213
第9章 連續(xù)發(fā)酵技術(shù) 222
實(shí)驗(yàn)42酵母的連續(xù)發(fā)酵技術(shù) 222
第10章 動(dòng)植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù) 229
實(shí)驗(yàn)43動(dòng)物細(xì)胞懸浮培養(yǎng) 229
實(shí)驗(yàn)44植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng) 237
實(shí)驗(yàn)45共聚焦顯微技術(shù) 239
第5篇 免 瘦 學(xué)
第11章 免疫學(xué)技術(shù) 246
實(shí)驗(yàn)46環(huán)狀沉淀反應(yīng) 246
實(shí)驗(yàn)47單向瓊脂擴(kuò)散實(shí)驗(yàn) 247
實(shí)驗(yàn)48雙向瓊脂擴(kuò)散實(shí)驗(yàn) 249
實(shí)驗(yàn)49對(duì)流免疫電泳實(shí)驗(yàn) 250
實(shí)驗(yàn)50火箭電泳實(shí)驗(yàn) 252
實(shí)驗(yàn)51酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(EI ISA) 253
實(shí)驗(yàn)52 BA_ELISA 255
實(shí)驗(yàn)53抗原和免疫血清的制備 257
實(shí)驗(yàn)54動(dòng)物細(xì)胞免疫熒光技術(shù) 259
實(shí)驗(yàn)55淋巴細(xì)胞雜交瘤單克隆抗體技術(shù) 261
實(shí)驗(yàn)56鹽析法純化免疫球蛋白 265
實(shí)驗(yàn)57 DEAE_Sephadex A_50柱層析純化免疫球蛋白 268
實(shí)驗(yàn)58 Sepharose CL 4B親和柱層析純化IgG及IgG亞類 270
實(shí)驗(yàn)59高效液相色譜法純化小鼠腹水中單克隆抗體 272
實(shí)驗(yàn)60單克隆抗體親和層析柱純化重組人a2a干擾素 273
實(shí)驗(yàn)61免疫球蛋白酶標(biāo)記抗體技術(shù) 274
實(shí)驗(yàn)62熒光素標(biāo)記抗體技術(shù) 276
實(shí)驗(yàn)63免疫斑點(diǎn)實(shí)驗(yàn) 279
實(shí)驗(yàn)64免疫組化染色技術(shù)檢測(cè)淋巴細(xì)胞表面標(biāo)記 281
實(shí)驗(yàn)65免疫共沉淀實(shí)驗(yàn) 285
參考文獻(xiàn) 289
附錄1常用緩沖溶液的配制 291
附錄2常用培養(yǎng)基的配制 297
附錄3不同溫度下硫酸銨飽和度計(jì)算表 305