目錄
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前言
第一部分 植物細(xì)胞生理和細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)
1 植物細(xì)胞的活體染色與細(xì)胞死活鑒定 3
2 植物組織(細(xì)胞)化學(xué)染色技術(shù) 6
2.1 核酸的組織化學(xué)鑒定 7
2.1.1 孚爾根法鑒定DNA 7
2.1.2 甲基綠-派羅寧法鑒定DNA、RNA 9
2.2 酶的組織化學(xué)鑒定 9
2.2.1 多酚氧化酶染色法 9
2.2.2 細(xì)胞色素氧化酶染色法 11
2.2.3 酸性磷酸酯酶染色法 12
2.2.4 三磷酸腺苷酶染色法 13
2.2.5 轉(zhuǎn)基因植物的β-葡萄糖苷酸酶(GUS)活性的組織化學(xué)鑒定 14
3 植物細(xì)胞熒光檢測(cè)技術(shù) 16
3.1 植物肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的熒光標(biāo)記 17
3.2 植物微管蛋白的免疫熒光染色 18
3.3 細(xì)胞核的熒光標(biāo)記 19
3.4 顯微注射熒光探針?lè)ㄑ芯恐参锛?xì)胞間的共質(zhì)體通訊 21
4 植物活細(xì)胞中自由鈣的檢測(cè) 23
4.1 氣孔保衛(wèi)細(xì)胞中游離鈣濃度的測(cè)定 25
4.2 植物花粉管胞質(zhì)游離鈣濃度的測(cè)定 26
5 熒光探針?lè)�測(cè)定植物細(xì)胞內(nèi)pH的變化 28
參考文獻(xiàn) 30
第二部分 植物水分生理和礦質(zhì)營(yíng)養(yǎng)
6 壓力室法測(cè)定植物組織水勢(shì) 33
7 溶液滲透濃度測(cè)定儀測(cè)定植物組織滲透勢(shì)的方法 37
8 用CB-1301型穩(wěn)態(tài)氣孔計(jì)測(cè)定葉片蒸騰速率和氣孔導(dǎo)度 40
9 植物葉片氣孔運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié) 43
10 植物的溶液培養(yǎng)及缺素診斷 45
11 植物根系活力的測(cè)定(TTC法) 50
12 硝酸還原酶活性測(cè)定 52
13 H+-ATPase活性測(cè)定 54
13.1 質(zhì)膜H+-ATPase活性的測(cè)定 54
13.2 液泡膜H+-ATPase活性的測(cè)定 56
14 原子吸收光譜測(cè)定植物中K+含量 59
15 測(cè)定植物全細(xì)胞跨膜鉀離子流的膜片鉗技術(shù) 61
參考文獻(xiàn) 66
第三部分 植物的光合作用和呼吸代謝
16 葉綠體色素的提取和定量分析 69
17 紅外線CO2儀測(cè)定葉片的光合速率、呼吸速率以及CO2補(bǔ)償點(diǎn) 73
18 氧電極法測(cè)定葉片組織和分離葉綠體的光合速率和呼吸速率 78
18.1 綠色植物葉片組織的光合放氧速率和呼吸速率測(cè)定 81
18.2 分離葉綠體的光合放氧速率測(cè)定 83
19 離體葉綠體的光還原反應(yīng) 87
20 離體線粒體的氧化作用和磷酸化作用 89
21 二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)羧化活性的測(cè)定 93
21.1 分光光度法 93
21.2 同位素法 95
22 PEP羧化酶活性的測(cè)定 97
參考文獻(xiàn) 100
第四部分 植物激素和次生物質(zhì)檢測(cè)
23 植物激素提取和分析常識(shí) 103
24 植物細(xì)胞分裂素類物質(zhì)的分離提取 106
25 HPLC-ELISA法測(cè)定細(xì)胞分裂素 109
26 植物激素乙烯的氣相色譜法測(cè)定 113
27 ABA免疫組織化學(xué)定位模型實(shí)驗(yàn) 116
28 生長(zhǎng)素的生理效應(yīng)及生物鑒定法 121
28.1 用芽鞘伸長(zhǎng)法測(cè)定生長(zhǎng)素類物質(zhì)的濃度和效價(jià) 121
28.2 用綠豆根形成法測(cè)定生長(zhǎng)素類物質(zhì)的濃度或效價(jià) 122
29 赤霉素的生物測(cè)定 125
30 赤霉素對(duì)α-淀粉酶的誘導(dǎo)形成 129
31 細(xì)胞分裂素對(duì)菜豆葉片生長(zhǎng)和衰老的效應(yīng) 131
32 生長(zhǎng)素和乙烯對(duì)葉片脫落的效應(yīng) 134
33 分光光度法測(cè)定煙堿含量 136
33.1 紫外分光光度法 137
33.2 萃取分光光度法 139
參考文獻(xiàn) 141
第五部分 植物生長(zhǎng)發(fā)育及其調(diào)控
34 葉片培養(yǎng)——植物組織培養(yǎng)中的脫分化與再分化過(guò)程 145
35 植物細(xì)胞薄層培養(yǎng) 149
36 植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng) 152
37 擬南芥葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體的分離、培養(yǎng)及應(yīng)用 155
38 擬南芥的遺傳轉(zhuǎn)化——浸蘸法 160
39 日本牽牛開花的光周期誘導(dǎo)與成花信號(hào)轉(zhuǎn)移 165
40 植物成花刺激物的傳遞 167
41 花粉萌發(fā)和花粉活力的測(cè)定 169
41.1 花粉萌發(fā)的測(cè)定 169
41.2 花粉活力的測(cè)定 170
41.2.1 TTC顯色法 170
41.2.2 I2-KI染色測(cè)定法 171
41.2.3 過(guò)氧化物酶法 171
42 種子生活力測(cè)定 173
42.1 溴麝香草酚藍(lán)(BTB)法 173
42.2 氯化三苯基四氮唑(TTC)法 174
42.3 紅墨水染色法 175
42.4 熒光法 175
43 種子萌發(fā)的調(diào)控 177
43.1 光質(zhì)對(duì)種子萌發(fā)的影響 177
43.2 外源植物激素對(duì)種子萌發(fā)的影響 178
44 擬南芥發(fā)育缺陷突變體mt50 的表型觀察 180
參考文獻(xiàn) 183
第六部分 植物逆境生理
45 植物游離脯氨酸含量的測(cè)定 187
46 甜菜堿含量測(cè)定 189
47 植物保護(hù)酶(SOD，POD，CAT)活性測(cè)定 191
47.1 SOD活性測(cè)定——NBT法 191
47.2 過(guò)氧化氫酶活性的測(cè)定 193
47.3 過(guò)氧化物酶活性的測(cè)定 194
48 H2O2含量的測(cè)定和組化定位檢測(cè) 197
48.1 H2O2含量的測(cè)定 197
48.1.1 分光光度計(jì)法 197
48.1.2 熒光分光光度計(jì)法 198
48.2 過(guò)氧化氫組化定位檢測(cè)——DAB染色法 199
49 植物組織中丙二醛含量測(cè)定 201
50 電導(dǎo)儀法測(cè)定植物細(xì)胞質(zhì)膜透性 203
51 鹽脅迫對(duì)擬南芥鹽敏感突變體生長(zhǎng)的影響 205
52 RD29A--US 轉(zhuǎn)基因植物在非生物脅迫下的基因表達(dá)分析 210
53 植物組織電阻和電位的測(cè)定 213
參考文獻(xiàn) 216
附錄 217
一、取樣及植物材料處理的原則 217
二、計(jì)量單位 218
三、常用緩沖液 220
四、常用植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)主要性質(zhì) 226
五、組織培養(yǎng)常用培養(yǎng)基配方 227
參考文獻(xiàn) 230