近十年來，細胞培養(yǎng)基無論在理論和技術(shù)方面都取得了迅猛的發(fā)展，涉及到一系列關(guān)鍵的理論和技術(shù)。本書包括動物細胞培養(yǎng)基礎(chǔ)知識、動物細胞培養(yǎng)方法、經(jīng)典培養(yǎng)基、低血清培養(yǎng)基、昆蟲細胞培養(yǎng)基、CHO細胞培養(yǎng)基、HEK293細胞培養(yǎng)基、疫苗細胞培養(yǎng)基、干細胞培養(yǎng)基、免疫細胞培養(yǎng)基及動物細胞培養(yǎng)基國家標準及質(zhì)量控制、重組蛋白糖基化修飾與控制及重組抗體質(zhì)量控制等內(nèi)容。
本書反映了近十年來培養(yǎng)基的最新進展，可作為生物制藥相關(guān)專業(yè)本科生、研究生及從事生物制藥的廣大科研工作人員參考用書。
王天云，博士，教授，博士生導(dǎo)師。新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院“太行學(xué)者”特聘教授。河南省重組藥物蛋白表達系統(tǒng)國際聯(lián)合實驗室及生物創(chuàng)新藥物工程技術(shù)研究中心主任，中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)會理事，河南省生物化學(xué)與分子生物學(xué)會理事長，教育部“長江學(xué)者”，國家科技進步獎評審專家。主持國家自然科學(xué)基金4項，省重大科技專項1項，創(chuàng)新杰出人才項目1項；參與國家“863”課題、國家重大科技專項各1項。獲省科技進步二等獎2項、三等獎1項。申請國家發(fā)明專利35項，已授權(quán)16項。發(fā)表研究論文86篇，其中SCI收錄53篇，被引1076次。長期從事哺乳動物細胞表達系統(tǒng)的研究，建立了國際水平的哺乳細胞表達系統(tǒng)，包括高效表達載體、細胞系及培養(yǎng)基。已實現(xiàn)技術(shù)轉(zhuǎn)移2項，專利轉(zhuǎn)化8項。
第一章動物細胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)知識1
第一節(jié)動物細胞培養(yǎng)的分類、發(fā)展史及應(yīng)用1
一、動物細胞培養(yǎng)的概念及分類1
二、動物細胞培養(yǎng)的發(fā)展史2
三、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用6
第二節(jié)動物細胞培養(yǎng)的基本知識7
一、動物細胞培養(yǎng)的細胞生物學(xué)知識7
二、體外培養(yǎng)動物細胞的分型7
三、體外培養(yǎng)動物細胞的生長和增殖過程8
四、體外培養(yǎng)動物細胞的生長條件10
第三節(jié)動物細胞培養(yǎng)基12
一、動物細胞培養(yǎng)基的成分12
二、動物細胞培養(yǎng)基分類、選擇及保存15
三、優(yōu)化動物細胞培養(yǎng)基17
第四節(jié)動物血清及替代物18
一、血清分類18
二、血清的主要成分及作用19
三、血清儲存、解凍及處理20
四、血清測試21
五、動物血清潛在風(fēng)險及預(yù)防22
六、血清替代物24
參考文獻26
第二章動物細胞培養(yǎng)方法28
第一節(jié)動物細胞監(jiān)管與鑒定28
一、動物細胞監(jiān)管29
二、動物細胞系的鑒定31
第二節(jié)動物細胞污染鑒定與消除36
一、常見動物細胞污染類型及原因36
二、常見生物污染物的種類及檢測37
三、細胞污染的預(yù)防39
四、細胞污染的消除43
第三節(jié)動物細胞的凍存與復(fù)蘇46
一、動物細胞的凍存46
二、凍存細胞的儲存47
三、凍存細胞的運輸50
四、凍存細胞的復(fù)蘇51
第四節(jié)動物細胞庫的建立53
一、動物主細胞庫建立53
二、動物主細胞庫評估54
第五節(jié)動物細胞培養(yǎng)相關(guān)試劑的制備56
一、平衡鹽溶液56
二、生物緩沖溶液59
三、細胞消化和解離試劑60
四、細胞凍存液和低溫保存液的配制63
五、細胞計數(shù)和活力測定相關(guān)試劑66
六、消除細胞污染常用溶液67
參考文獻70
第三章經(jīng)典動物細胞培養(yǎng)基73
第一節(jié)經(jīng)典動物細胞培養(yǎng)基73
一、經(jīng)典動物細胞培養(yǎng)基及應(yīng)用73
二、經(jīng)典動物細胞培養(yǎng)基配方75
第二節(jié)動物細胞培養(yǎng)基制備78
一、液體細胞培養(yǎng)基的制備78
二、干粉細胞培養(yǎng)基的制備81
參考文獻83
第四章低血清動物細胞培養(yǎng)基85
第一節(jié)低血清動物細胞培養(yǎng)基的概念及應(yīng)用85
一、低血清動物細胞培養(yǎng)基的概念及特點85
二、低血清動物細胞培養(yǎng)基的應(yīng)用86
第二節(jié)常見低血清培養(yǎng)基的成分、配方及制備87
一、低血清動物細胞培養(yǎng)基成分及作用87
二、低血清動物細胞培養(yǎng)基種類及配方88
第三節(jié)低血清動物細胞培養(yǎng)基制備93
一、液體細胞培養(yǎng)基的配制93
二、干粉細胞培養(yǎng)基的配制94
參考文獻95
第五章昆蟲細胞培養(yǎng)基97
第一節(jié)昆蟲細胞的種類、培養(yǎng)及應(yīng)用97
一、昆蟲細胞的種類97
二、昆蟲細胞的培養(yǎng)98
三、昆蟲細胞培養(yǎng)的應(yīng)用100
第二節(jié)昆蟲細胞培養(yǎng)基101
一、昆蟲細胞經(jīng)典培養(yǎng)基101
二、昆蟲細胞無血清培養(yǎng)基104
參考文獻106
第六章CHO細胞培養(yǎng)基108
第一節(jié)CHO細胞的種類、培養(yǎng)和應(yīng)用108
一、CHO細胞的種類108
二、CHO細胞的應(yīng)用111
第二節(jié)CHO細胞培養(yǎng)基112
一、CHO細胞經(jīng)典培養(yǎng)基112
二、CHO細胞無血清培養(yǎng)基112
三、CHO細胞培養(yǎng)基開發(fā)的新進展127
參考文獻130
第七章HEK293細胞培養(yǎng)基132
第一節(jié)HEK293細胞的種類、培養(yǎng)和應(yīng)用132
一、HEK293細胞的種類132
二、HEK293細胞的培養(yǎng)135
三、HEK293細胞的應(yīng)用138
第二節(jié)HEK293細胞培養(yǎng)基及制備139
一、HEK293細胞經(jīng)典培養(yǎng)基139
二、HEK293細胞無血清培養(yǎng)基139
參考文獻141
第八章疫苗細胞培養(yǎng)基143
第一節(jié)疫苗細胞的種類及應(yīng)用143
一、用于疫苗生產(chǎn)的常用細胞系144
二、當(dāng)前開發(fā)的新型細胞系147
三、用于疫苗生產(chǎn)的其他新細胞系149
四、疫苗細胞的培養(yǎng)150
五、疫苗細胞的應(yīng)用151
第二節(jié)疫苗細胞培養(yǎng)基151
一、疫苗細胞經(jīng)典培養(yǎng)基152
二、疫苗細胞無血清培養(yǎng)基154
參考文獻159
第九章干細胞培養(yǎng)基161
第一節(jié)干細胞種類、培養(yǎng)及應(yīng)用161
一、干細胞的種類161
二、干細胞的培養(yǎng)163
三、干細胞的應(yīng)用167
第二節(jié)干細胞培養(yǎng)基168
一、干細胞經(jīng)典培養(yǎng)基168
二、干細胞無血清培養(yǎng)基169
參考文獻178
第十章免疫細胞培養(yǎng)基180
第一節(jié)免疫細胞的種類、培養(yǎng)及應(yīng)用180
一、免疫細胞種類180
二、免疫細胞的培養(yǎng)184
三、免疫細胞的應(yīng)用186
第二節(jié)免疫細胞培養(yǎng)基187
一、免疫細胞經(jīng)典培養(yǎng)基187
二、免疫細胞無血清培養(yǎng)基189
參考文獻192
第十一章動物細胞培養(yǎng)基標準及質(zhì)量控制194
第一節(jié)動物細胞培養(yǎng)基標準194
一、動物細胞培養(yǎng)基的國際相關(guān)標準與要求194
二、動物細胞培養(yǎng)基的國內(nèi)相關(guān)法律法規(guī)195
第二節(jié)細胞培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)質(zhì)量達標檢查管理指導(dǎo)原則196
一、申請單位需提供的材料196
二、材料審核和現(xiàn)場檢查196
三、檢查結(jié)果評定197
第三節(jié)細胞培養(yǎng)基質(zhì)量檢驗方法198
一、理化指標檢測198
二、微生物檢查法200
三、細胞生長試驗200
四、細胞培養(yǎng)基安全技術(shù)說明201
第四節(jié)細胞培養(yǎng)基質(zhì)量控制202
一、細胞培養(yǎng)基生產(chǎn)的GMP管理202
二、細胞培養(yǎng)基的生產(chǎn)和過程控制205
參考文獻208
附錄中英文詞匯表209
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