本書結(jié)合作者及其同事多年來的教學和研究工作,在廣泛收集和整理國內(nèi)外大量文獻的基礎上,比較全面而系統(tǒng)地介紹了生物工程專業(yè)基本技術的原理與實踐。全書分為基本技術的原理和基本技術實驗兩部分;炯夹g原理主要包括離心技術、分光光度技術、層析技術、電泳技術、顯微攝影技術、染色體制備技術、熒光染色技術、PCR技術和微生物菌種保藏技術的原理;基本技術實驗是基本技術原理的實踐與應用。
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目錄
第一部分 基本技術與原理
第一章 離心技術 3
一、離心技術的基本原理 3
二、離心裝置 3
三、離心方法 3
第二章 分光光度技術 7
一、儀器的類型與組成 7
二、儀器的工作原理 7
三、儀器的工作環(huán)境 8
四、注意事項 8
第三章 色譜技術 9
一、紙色譜法 9
二、薄層色譜法 9
三、聚酰胺薄膜色譜法 10
四、凝膠色譜法 10
五、離子交換色譜法 11
六、親和色譜法 11
七、氣相色譜法 12
八、高效液相色譜法 13
第四章 電泳技術 14
一、電泳技術的基本原理 14
二、影響電泳的因素 15
三、瓊脂糖凝膠電泳技術 18
四、聚丙烯酰胺電泳技術 21
五、其他電泳技術 23
第五章 顯微攝影技術 26
一、顯微攝影技術的基本原理 26
二、顯微攝影的基本裝置 26
三、顯微攝影的操作步驟 27
四、注意事項 28
第六章 染色體制備技術 29
一、染色體制備技術的基本原理 29
二、植物細胞染色體制備 30
三、人類細胞染色體制備 30
第七章 熒光染色技術 32
一、熒光染色技術的基本原理 32
二、熒光染色技術的應用 34
三、注意事項 37
第八章 PCR技術 39
一、PCR技術的基本原理 39
二、PCR結(jié)果異常分析 41
三、PCR的類型 43
第九章 微生物菌種保藏技術 47
一、菌種保藏的原理 47
二、常用的幾種菌種保藏方法 47
第二部分 基本技術實驗
實驗一 脂肪碘值和過氧化值的測定 55
實驗二 植物組織中維生素C含量的測定 59
實驗三 丙二醛含量的測定 62
實驗四 植物組織中蛋白質(zhì)含量的測定 67
實驗五 還原糖和總糖含量的測定 70
實驗六 溫度、pH、激活劑和抑制劑對酶活力的影響 74
實驗七 種子萌發(fā)前后淀粉酶酶活力的比較 79
實驗八 過氧化氫酶米氏常數(shù)的測定 82
實驗九 微生物培養(yǎng)基的制備及滅菌 86
實驗十 革蘭氏染色和芽胞染色 92
實驗十一 顯微鏡的使用和細菌形態(tài)的觀察 96
實驗十二 放線菌、酵母菌和霉菌形態(tài)的觀察 99
實驗十三 微生物顯微計數(shù)和大小測量 102
實驗十四 特殊顯微鏡的使用和顯微攝影 107
實驗十五 細胞核和細胞器的分離與鑒定 117
實驗十六 葉綠體的分離和熒光觀察 120
實驗十七 小鼠腎原代細胞的分離及細胞計數(shù) 122
實驗十八 細胞的消化、傳代和凍存 125
實驗十九 細胞早熟凝集染色體的制備及觀察 128
實驗二十 染色體端粒的顯示與觀察 132
實驗二十一 海拉細胞凋亡的誘導與檢測 137
實驗二十二 植物細胞骨架的顯示與觀察 140
實驗二十三 動物細胞骨架的顯示與觀察 143
實驗二十四 DNA提取及瓊脂糖凝膠電泳技術 146
實驗二十五 RNA的提取與檢測 152
實驗二十六 PCR擴增DNA 技術 157
參考文獻 160
附錄1 實驗室要求與規(guī)范 162
附錄2 常用儀器的使用 170
附錄3 器皿的洗滌 181
附錄4 溶液的配制 183
附錄5 常用試劑 186