生物技術(shù)制藥實(shí)驗(yàn)指南
定 價(jià):45 元
- 作者:程玉鵬,高寧 編
- 出版時(shí)間:2014/9/1
- ISBN:9787511617903
- 出 版 社:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)技術(shù)出版社
- 中圖法分類:TQ464-33
- 頁(yè)碼:240
- 紙張:膠版紙
- 版次:1
- 開本:16開
隨著生物醫(yī)藥研究的迅猛發(fā)展,生物技術(shù)藥物在新藥開發(fā)中占有越來越重要的位置,也是當(dāng)今各大醫(yī)藥企業(yè)重點(diǎn)關(guān)注的藥物研究領(lǐng)域!渡锛夹g(shù)制藥實(shí)驗(yàn)指南》主要介紹了生物技術(shù)制藥實(shí)驗(yàn)的基本儀器特點(diǎn)與使用、基本實(shí)驗(yàn)操作方法及注意事項(xiàng),并在最后設(shè)計(jì)了綜合性實(shí)驗(yàn),以供讀者全面掌握生物技術(shù)藥物實(shí)驗(yàn)研究的方法及應(yīng)用。全書共分十二章,分別介紹了生物技術(shù)制藥實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)則、常用儀器及操作規(guī)范、顯微觀察技術(shù)、滅菌技術(shù)、核酸分析技術(shù)、組織與細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)、微生物培養(yǎng)技術(shù)、轉(zhuǎn)基因技術(shù)、誘變育種技術(shù)、生物活性物質(zhì)的分離檢測(cè)技術(shù)和綜合性實(shí)驗(yàn)。
程玉鵬,博士,黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院副教授,主要研究藥效成分的生物合成途徑及微生物生物活性成分,2007年參加編寫過《中藥資源學(xué)》,主持了“三江地區(qū)土壤微生物的分離鑒定及群落特征分析”項(xiàng)目研究工作。
第一章 實(shí)驗(yàn)室管理和安全準(zhǔn)則
一、實(shí)驗(yàn)室一般要求
二、生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)室規(guī)則
三、生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)室的安全管理與注意事項(xiàng)
四、實(shí)驗(yàn)室意外事故的緊急處理
第二章 生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)常用儀器及操作規(guī)范
一、玻璃器皿
二、塑料制品
三、過濾裝置
四、微量移液器及吸頭
五、pH計(jì)
六、天平
七、離心機(jī)
八、恒溫箱
九、振蕩設(shè)備
十、超凈工作臺(tái)
十一、生物安全柜
十二、純水儀
十三、滅菌設(shè)備
十四、紫外-可見分光光度計(jì)
十五、熱循環(huán)儀
十六、電泳儀
十七、凝膠成像系統(tǒng)
十八、流式細(xì)胞儀
十九、超聲細(xì)胞破碎儀
二十、制冰機(jī)
二十一、液氮罐
二十二、冰箱
二十三、真空離心濃縮儀
二十四、基因槍
二十五、新一代高通量測(cè)序技術(shù)
第三章 顯微觀察技術(shù)
一、普通光學(xué)顯微鏡
二、相差顯微鏡
三、倒置顯微鏡
四、熒光顯微鏡
五、激光掃描共聚焦顯微鏡
六、透射電子顯微鏡
七、掃描電子顯微鏡
實(shí)驗(yàn)一 細(xì)菌顯微形態(tài)特征觀察
實(shí)驗(yàn)二 絲狀真菌顯微形態(tài)特征觀察
實(shí)驗(yàn)三 酵母菌顯微形態(tài)特征觀察
實(shí)驗(yàn)四 酵母細(xì)胞大小和數(shù)量的測(cè)定
第四章 緩沖液、培養(yǎng)基的配制及滅菌技術(shù)
一、溶液的配制
二、化學(xué)品和廢棄緩沖液的處理
三、儀器
實(shí)驗(yàn)一 MS培養(yǎng)基的配制
實(shí)驗(yàn)二 LB培養(yǎng)基的配制
第五章 核酸分析技術(shù)
一、儲(chǔ)存
二、純化-除去核酸中的蛋白質(zhì)
三、核酸的定量
四、濃縮沉淀
五、DNA酶切反應(yīng)
六、DNA連接
七、電泳
八、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)
實(shí)驗(yàn)一 堿裂解法提取質(zhì)粒DNA
實(shí)驗(yàn)二 DNA的瓊脂糖凝膠電泳
實(shí)驗(yàn)三 細(xì)菌基因組DNA的提取和鑒定
實(shí)驗(yàn)四 釀酒酵母總DNA的提取
實(shí)驗(yàn)五 植物基因組DNA提取
實(shí)驗(yàn)六 動(dòng)物組織DNA的提取
實(shí)驗(yàn)七 采用Trizol溶液提取細(xì)菌總RNA
實(shí)驗(yàn)八 動(dòng)物組織mRNA的提取
實(shí)驗(yàn)九 DNA的酶切
實(shí)驗(yàn)十 DNA的連接
實(shí)驗(yàn)十一 脈沖場(chǎng)凝膠電泳(PFGE)
實(shí)驗(yàn)十二 RNA瓊脂糖變性膠電泳分析
實(shí)驗(yàn)十三 真菌ITS序列的PCR擴(kuò)增
實(shí)驗(yàn)十四 菌落PCR
實(shí)驗(yàn)十五 DD-PCR技術(shù)
實(shí)驗(yàn)十六 實(shí)時(shí)定量PCR
實(shí)驗(yàn)十七 Southem印跡雜交
實(shí)驗(yàn)十八 Northem雜交技術(shù)
實(shí)驗(yàn)十九 原位雜交
第六章 蛋白分析技術(shù)
一、選擇沉淀
二、蛋白質(zhì)的聚丙烯酰胺凝膠電泳
三、雙向凝膠電泳
四、蛋白濃度檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)一 植物中葉片蛋白質(zhì)的提取
實(shí)驗(yàn)二 動(dòng)物組織蛋白質(zhì)的提取
實(shí)驗(yàn)三 蛋白質(zhì)的定量(BCA法)
實(shí)驗(yàn)四 蛋白質(zhì)SDS-PAGE電泳
實(shí)驗(yàn)五 蛋白質(zhì)雙向電泳
實(shí)驗(yàn)六 Western Blotting
實(shí)驗(yàn)七 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)八 免疫組化實(shí)驗(yàn)
第七章 組織與細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
一、動(dòng)物組織培養(yǎng)
二、植物組織培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)一 哺乳動(dòng)物細(xì)胞的原代培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)二 哺乳動(dòng)物細(xì)胞的傳代培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)三 哺乳動(dòng)物細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇
實(shí)驗(yàn)四 哺乳動(dòng)物細(xì)胞的融合
實(shí)驗(yàn)五 兔脾細(xì)胞懸液的制備
實(shí)驗(yàn)六 小鼠脾細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)七 胡蘿卜愈傷組織的培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)八 植物原生質(zhì)體的制備
實(shí)驗(yàn)九 原生質(zhì)體分離與融合
第八章 微生物培養(yǎng)
一、細(xì)菌培養(yǎng)
二、真核微生物的培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)一 藥植土壤中根際微生物的分離與計(jì)數(shù)
實(shí)驗(yàn)二 細(xì)菌生長(zhǎng)曲線的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)三 釀酒酵母海藻酸鈣的細(xì)胞固定化
第九章 轉(zhuǎn)基因技術(shù)
一、細(xì)菌轉(zhuǎn)基因
二、酵母菌轉(zhuǎn)基因
三、植物轉(zhuǎn)基因
四、動(dòng)物轉(zhuǎn)基因
實(shí)驗(yàn)一 CaCl2法制備感受態(tài)細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)二 質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)三 電轉(zhuǎn)化法制備細(xì)菌感受態(tài)細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)四 基因槍法轉(zhuǎn)化油萊愈傷組織
實(shí)驗(yàn)五 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的植物遺傳轉(zhuǎn)化
實(shí)驗(yàn)六 逆轉(zhuǎn)錄病毒感染法制備轉(zhuǎn)基因細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)七 顯微注射法制備轉(zhuǎn)基因小鼠
第十章 誘變技術(shù)
實(shí)驗(yàn)一 大腸桿菌的紫外誘變
實(shí)驗(yàn)二 氨基酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株的篩選
第十一章 生物活性物質(zhì)的分離與檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)一 抗生素的微生物檢定法
實(shí)驗(yàn)二 牛乳中酪蛋白的制備
實(shí)驗(yàn)三 γ-球蛋白的分離
實(shí)驗(yàn)四 大蒜SOD的分離提取與活力測(cè)定
實(shí)驗(yàn)五 滑菇多糖的提取制備和鑒定
實(shí)驗(yàn)六 凝血酶的制備
第十二章 綜合實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)一 基因組DNA文庫(kù)的構(gòu)建
實(shí)驗(yàn)二 突變細(xì)胞基因差異表達(dá)的研究
附錄
主要參考文獻(xiàn)