本書系統(tǒng)介紹了生物工程專業(yè)基礎(chǔ)性、綜合性及設(shè)計性實(shí)驗(yàn)方法和技術(shù)，在編寫過程中注重培養(yǎng)學(xué)生綜合開發(fā)設(shè)計實(shí)驗(yàn)和獨(dú)立從事實(shí)驗(yàn)操作的能力，使學(xué)生在掌握基本實(shí)驗(yàn)方法的基礎(chǔ)上，提升學(xué)生的綜合能力，增強(qiáng)對書本知識的綜合應(yīng)用及分析能力。全書分為發(fā)酵工程、細(xì)胞工程、酶工程、基因工程四部分，每部分都由若干個實(shí)驗(yàn)組成。另外有部分實(shí)驗(yàn)放在二維碼中，可掃描下載。
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目錄
前言
第一部分 發(fā)酵工程實(shí)驗(yàn) 1
Ⅰ. 基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn) 1
實(shí)驗(yàn)一 產(chǎn)淀粉酶芽孢桿菌的分離 1
實(shí)驗(yàn)二 產(chǎn)蛋白酶菌株的分離 1
實(shí)驗(yàn)三 乳酸菌素產(chǎn)生菌的篩選 4
實(shí)驗(yàn)四 紫外線誘變選育α-淀粉酶高產(chǎn)菌株 11
實(shí)驗(yàn)五 酸性異淀粉酶產(chǎn)生菌的復(fù)合誘變育種 11
實(shí)驗(yàn)六 細(xì)菌原生質(zhì)體融合實(shí)驗(yàn) 14
實(shí)驗(yàn)七 微生物菌種的保藏 18
實(shí)驗(yàn)八 微生物培養(yǎng)基的優(yōu)化——單因素實(shí)驗(yàn) 22
實(shí)驗(yàn)九 微生物培養(yǎng)基的優(yōu)化——正交試驗(yàn) 22
實(shí)驗(yàn)十 霉菌孢子數(shù)及發(fā)芽率的測定 26
實(shí)驗(yàn)十一 細(xì)菌生長曲線測定 28
實(shí)驗(yàn)十二 細(xì)菌淀粉酶酶活曲線的測定 30
實(shí)驗(yàn)十三 機(jī)械通風(fēng)攪拌發(fā)酵罐的結(jié)構(gòu)認(rèn)識及操作 30
實(shí)驗(yàn)十四 酵母細(xì)胞中蔗糖酶粗產(chǎn)物的提取 34
實(shí)驗(yàn)十五 枯草芽孢桿菌發(fā)酵液中α-淀粉酶粗產(chǎn)物的提取 34
實(shí)驗(yàn)十六 厭氧菌的分離及培養(yǎng)技術(shù) 34
Ⅱ. 綜合設(shè)計實(shí)驗(yàn) 37
實(shí)驗(yàn)十七 生物殺蟲劑蘇云金芽孢桿菌生產(chǎn)實(shí)驗(yàn) 37
實(shí)驗(yàn)十八 檸檬酸發(fā)酵 39
實(shí)驗(yàn)十九 固體發(fā)酵生產(chǎn)纖維素酶 43
實(shí)驗(yàn)二十 酸奶的發(fā)酵 47
第二部分 細(xì)胞工程實(shí)驗(yàn) 50
Ⅰ. 基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn) 50
實(shí)驗(yàn)一 MS培養(yǎng)基母液和培養(yǎng)基的配制 50
實(shí)驗(yàn)二 植物組織培養(yǎng)技術(shù) 53
實(shí)驗(yàn)三 植物細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)技術(shù) 58
實(shí)驗(yàn)四 植物原生質(zhì)體分離鑒定和培養(yǎng) 58
實(shí)驗(yàn)五 植物細(xì)胞融合 62
實(shí)驗(yàn)六 動物細(xì)胞融合 62
實(shí)驗(yàn)七 動物細(xì)胞微絲束的光學(xué)顯微鏡觀察 62
實(shí)驗(yàn)八 線粒體和液泡系的超活染色與觀察 65
實(shí)驗(yàn)九 葉綠體的分離與熒光觀察 67
實(shí)驗(yàn)十 細(xì)胞凝集反應(yīng) 69
實(shí)驗(yàn)十一 細(xì)胞膜的滲透性測定 70
實(shí)驗(yàn)十二 細(xì)胞活力檢測 72
實(shí)驗(yàn)十三 細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇 72
Ⅱ. 綜合設(shè)計實(shí)驗(yàn) 73
實(shí)驗(yàn)十四 細(xì)胞周期檢測與同步化 73
實(shí)驗(yàn)十五 細(xì)胞凋亡觀察 76
實(shí)驗(yàn)十六 顯微注射技術(shù) 76
實(shí)驗(yàn)十七 雜交瘤技術(shù) 77
實(shí)驗(yàn)十八 植物細(xì)胞的有絲分裂觀察及染色體標(biāo)本制備 83
實(shí)驗(yàn)十九 掃描電子顯微鏡的原理及操作使用 85
實(shí)驗(yàn)二十 透射電子顯微鏡的原理和操作使用 85
第三部分 酶工程實(shí)驗(yàn) 87
Ⅰ. 基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn) 87
實(shí)驗(yàn)一 酵母蔗糖酶的純化 87
實(shí)驗(yàn)二 圓盤電泳法鑒定酵母蔗糖酶的純度 89
實(shí)驗(yàn)三 酵母蔗糖酶的結(jié)晶 90
實(shí)驗(yàn)四 酵母蔗糖酶的化學(xué)修飾 90
實(shí)驗(yàn)五 SDS-PAGE檢測蔗糖酶分子質(zhì)量 92
實(shí)驗(yàn)六 酵母蔗糖酶的酶促動力學(xué)研究 92
實(shí)驗(yàn)七 固定化酵母細(xì)胞及蔗糖酶的檢測 95
實(shí)驗(yàn)八 木瓜蛋白酶消除啤酒中蛋白質(zhì)渾濁 97
實(shí)驗(yàn)九 尼龍固定化木瓜蛋白酶 98
實(shí)驗(yàn)十 幾丁載體上酶的吸附固定 98
實(shí)驗(yàn)十一 β-半乳糖苷酶菌體細(xì)胞的固定化 99
實(shí)驗(yàn)十二 淀粉酶的提取及活力測定 102
實(shí)驗(yàn)十三 大豆肽的制備 102
實(shí)驗(yàn)十四 苯丙氨酸解氨酶的純化及活性測定 103
實(shí)驗(yàn)十五 結(jié)晶乳酸脫氫酶(LDH)的制備 103
實(shí)驗(yàn)十六 辣根過氧化物酶的制備及酶比活力的測定 105
實(shí)驗(yàn)十七 凝膠層析柱裝填及柱效測定 106
實(shí)驗(yàn)十八 模擬過氧化物酶的制備、固定化及應(yīng)用 112
實(shí)驗(yàn)十九 植物組織中蔗糖酶活力的測定 112
實(shí)驗(yàn)二十 正交法測定幾種因素對酶活力的影響 113
Ⅱ. 綜合設(shè)計實(shí)驗(yàn) 117
實(shí)驗(yàn)二十一 酸性磷酸酶的分離純化及活性測定 117
實(shí)驗(yàn)二十二 堿性磷酸酶的分離、純化及活性測定 131
實(shí)驗(yàn)二十三 胰蛋白酶的制備、活力測定及動力學(xué)研究 131
實(shí)驗(yàn)二十四 重組氯霉素酰基轉(zhuǎn)移酶蛋白的表達(dá)、分離、純化和鑒定 139
第四部分 基因工程實(shí)驗(yàn) 145
Ⅰ. 基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn) 145
實(shí)驗(yàn)一 植物基因組DNA的提取 145
實(shí)驗(yàn)二 細(xì)菌基因組DNA的制備 145
實(shí)驗(yàn)三 質(zhì)粒DNA的提取及酶切 145
實(shí)驗(yàn)四 瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA 149
實(shí)驗(yàn)五 從低熔點(diǎn)膠瓊脂糖凝膠中分離回收DNA 片段 150
實(shí)驗(yàn)六 目的基因的PCR 擴(kuò)增和克隆 153
實(shí)驗(yàn)七 目的基因的酶切和連接 159
實(shí)驗(yàn)八 感受態(tài)細(xì)胞的制備及轉(zhuǎn)化 163
實(shí)驗(yàn)九 轉(zhuǎn)化子的篩選和鑒定 168
實(shí)驗(yàn)十 目的基因的原核表達(dá) 173
實(shí)驗(yàn)十一 植物總RNA的提取 179
實(shí)驗(yàn)十二 RNA質(zhì)量檢測 179
Ⅱ. 綜合設(shè)計實(shí)驗(yàn) 180
實(shí)驗(yàn)十三 目的基因的RT-PCR檢測 180
實(shí)驗(yàn)十四 目的基因表達(dá)的實(shí)時熒光定量PCR 檢測 187
實(shí)驗(yàn)十五 目的基因的Southern印跡雜交檢測 190
實(shí)驗(yàn)十六 目的基因表達(dá)的Northern印跡雜交檢測 195
實(shí)驗(yàn)十七 目的基因表達(dá)的Western印跡雜交檢測 197
實(shí)驗(yàn)十八 根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的植物基因轉(zhuǎn)化技術(shù) 200
主要參考文獻(xiàn) 203
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