醫(yī)學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程
本教材針對(duì)現(xiàn)下較為常用的生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)的原理、操作步驟、結(jié)果分析及實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)等進(jìn)行了詳細(xì)介紹與闡述。其中既有臨床醫(yī)學(xué)常用的生化檢測(cè)指標(biāo)，也有深入的分子生物學(xué)技術(shù)。本教材主要內(nèi)容分為四部分，第一部分介紹了實(shí)驗(yàn)室安全，實(shí)驗(yàn)報(bào)告的書寫與設(shè)計(jì)要點(diǎn)，常用儀器的使用及常用技術(shù)的原理，主要包括分光光度分析技術(shù)、層析技術(shù)、電泳技術(shù)、離心技術(shù)、PCR技術(shù)和分子雜交技術(shù)；第二部分是生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，主要介紹了蛋白相關(guān)實(shí)驗(yàn)、酶學(xué)實(shí)驗(yàn)、糖代謝和脂代謝相關(guān)實(shí)驗(yàn)，并在本部分最后設(shè)計(jì)了兩個(gè)綜合實(shí)驗(yàn)；第三部分是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，主要介紹了核酸的提取與鑒定、基因重組技術(shù)、分子雜交、蛋白質(zhì)免疫印跡實(shí)驗(yàn)等，最后也設(shè)計(jì)了兩個(gè)綜合實(shí)驗(yàn)；第四部分是自設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)。每個(gè)實(shí)驗(yàn)包括實(shí)驗(yàn)?zāi)康�、�?shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)操作、試劑配制與實(shí)驗(yàn)儀器、結(jié)果分析、注意事項(xiàng)及思考題等。附錄部分介紹了常用溶液和培養(yǎng)基的配制。本教材內(nèi)容系統(tǒng)，闡述簡(jiǎn)明，主要供高等醫(yī)學(xué)院校相關(guān)專業(yè)實(shí)驗(yàn)教學(xué)之用，也可供研究生和相關(guān)科研人員使用。
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第一篇 生物化學(xué)與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)基本要求
第一章 實(shí)驗(yàn)室安全守則(1)
第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)室規(guī)則(1)
第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)室安全(1)
第二章 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與實(shí)驗(yàn)報(bào)告(4)
第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)(4)
第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)誤差(5)
第三節(jié) 實(shí)驗(yàn)記錄(6)
第四節(jié) 實(shí)驗(yàn)報(bào)告(6)
第三章 基本實(shí)驗(yàn)技能(8)
第一節(jié) 基本操作(8)
第二節(jié) 常用實(shí)驗(yàn)器材的使用(9)
第四章 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與實(shí)驗(yàn)樣品(12)
第一節(jié) 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(12)
第二節(jié) 實(shí)驗(yàn)樣品(13)
第二篇 基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)及原理
第五章 分光光度技術(shù)(15)
第一節(jié) 基本原理(15)
第二節(jié) 分光光度計(jì)(16)
第六章 層析技術(shù)(18)
第一節(jié) 基本原理(18)
第二節(jié) 吸附層析(18)
第三節(jié) 分配層析(19)
第四節(jié) 離子交換層析(19)
第五節(jié) 凝膠層析(20)
第六節(jié) 親和層析(21)
第七章 電泳(24)
第一節(jié) 電泳的基本原理(24)
第二節(jié) 電泳的分類(25)
第三節(jié) 常用電泳技術(shù)(26)
第四節(jié) 電泳后大分子的檢測(cè)(28)
第八章 離心(29)
第一節(jié) 離心技術(shù)的基本原理(29)
第二節(jié) 離心分離的常用方法(30)
第三節(jié) 離心機(jī)的主要類型及使用(30)
第九章 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(33)
第一節(jié) 標(biāo)準(zhǔn)PCR(33)
第二節(jié) 逆轉(zhuǎn)錄PCR(34)
第三節(jié) 實(shí)時(shí)熒光定量PCR(34)
第四節(jié) 原位PCR(35)
第五節(jié) PCR擴(kuò)增產(chǎn)物分析(35)
第十章 印跡技術(shù)(37)
第一節(jié) 核酸分子雜交(37)
第二節(jié) 蛋白質(zhì)免疫印跡(38)
第十一章 重組DNA技術(shù)(40)
第一節(jié) 目的基因的獲取(40)
第二節(jié) 載體的選擇與構(gòu)建(41)
第三節(jié) 目的DNA與載體的連接(41)
第四節(jié) 重組DNA分子轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞(42)
第五節(jié) 重組體的篩選與鑒定(42)
第六節(jié) 目的基因的表達(dá)(43)
第三篇 生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)
第十二章 蛋白質(zhì)含量測(cè)定(44)
實(shí)驗(yàn)一 改良Lowry法測(cè)定蛋白質(zhì)含量(44)
實(shí)驗(yàn)二 改良微量凱氏定氮法測(cè)定蛋白質(zhì)含量(45)
實(shí)驗(yàn)三 考馬斯亮藍(lán)染色法測(cè)定蛋白質(zhì)含量(47)
實(shí)驗(yàn)四 BCA法測(cè)定蛋白質(zhì)含量(48)
實(shí)驗(yàn)五 紫外吸收法測(cè)定蛋白質(zhì)含量(49)
第十三章 蛋白質(zhì)的分離與純化(51)
實(shí)驗(yàn)六 醋酸纖維素薄膜電泳分離血清蛋白(51)
實(shí)驗(yàn)七 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE）分離血清蛋白(52)
實(shí)驗(yàn)八 凝膠柱層析法分離血紅蛋白與DNP-胰糜蛋白酶(54)
實(shí)驗(yàn)九 離子交換層析法分離混合氨基酸(55)
實(shí)驗(yàn)十 親和層析法純化谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶(57)
第十四章 酶學(xué)實(shí)驗(yàn)(59)
實(shí)驗(yàn)十一 血清肌酸激酶活性測(cè)定(59)
實(shí)驗(yàn)十二 堿性磷酸酶活性測(cè)定(61)
實(shí)驗(yàn)十三 改良穆氏法測(cè)谷-丙轉(zhuǎn)氨酶活性(62)
實(shí)驗(yàn)十四 琥珀酸脫氫酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制(64)
實(shí)驗(yàn)十五 乳酸脫氫酶同工酶分析(65)
第十五章 糖代謝(67)
實(shí)驗(yàn)十六 鄰甲苯胺法測(cè)血糖濃度(67)
實(shí)驗(yàn)十七 葡萄糖氧化酶法測(cè)血糖濃度(68)
實(shí)驗(yàn)十八 班氏定性法檢測(cè)尿糖(70)
實(shí)驗(yàn)十九 胰島素和腎上腺素對(duì)家兔血糖濃度的影響(71)
實(shí)驗(yàn)二十 飽食和饑餓對(duì)動(dòng)物肝糖原含量的影響(72)
第十六章 脂代謝(74)
實(shí)驗(yàn)二十一 血清甘油三酯含量的測(cè)定(74)
實(shí)驗(yàn)二十二 血清膽固醇含量的測(cè)定(76)
實(shí)驗(yàn)二十三 酮體的生成及測(cè)定(77)
實(shí)驗(yàn)二十四 超速離心法分離血漿脂蛋白(78)
第四篇 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
第十七章 基因組DNA的提取與鑒定(80)
實(shí)驗(yàn)二十五 蛋白酶K消化法提取基因組DNA(80)
實(shí)驗(yàn)二十六 改良碘化鉀法提取人外周血基因組DNA(82)
實(shí)驗(yàn)二十七 磁珠法提取外周血基因組DNA(83)
實(shí)驗(yàn)二十八 DNA的瓊脂糖凝膠電泳(84)
第十八章 RNA的提取與鑒定(86)
實(shí)驗(yàn)二十九 異硫氰酸胍法提取總RNA(86)
實(shí)驗(yàn)三十 動(dòng)物組織mRNA的提取(88)
實(shí)驗(yàn)三十一 RNA的甲醛變性凝膠電泳(90)
第十九章 感受態(tài)細(xì)胞的制備和轉(zhuǎn)化(92)
實(shí)驗(yàn)三十二 CaCl2法制備感受態(tài)細(xì)胞及質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化(92)
實(shí)驗(yàn)三十三 大腸埃希菌的電擊轉(zhuǎn)化(93)
第二十章 質(zhì)粒DNA的提取與酶切鑒定(96)
實(shí)驗(yàn)三十四 堿裂解法提取質(zhì)粒(96)
實(shí)驗(yàn)三十五 煮沸裂解法提取質(zhì)粒(98)
實(shí)驗(yàn)三十六 質(zhì)粒DNA的酶切鑒定(99)
第二十一章 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(101)
實(shí)驗(yàn)三十七 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）(101)
實(shí)驗(yàn)三十八 逆轉(zhuǎn)錄PCR(102)
實(shí)驗(yàn)三十九 實(shí)時(shí)定量PCR(104)
第二十二章 印跡技術(shù)(105)
實(shí)驗(yàn)四十 Southern印跡雜交實(shí)驗(yàn)(105)
實(shí)驗(yàn)四十一 Northern印跡雜交實(shí)驗(yàn)(107)
實(shí)驗(yàn)四十二 蛋白質(zhì)免疫印跡實(shí)驗(yàn)(109)
第五篇 綜合實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)四十三 糖脂代謝檢測(cè)(112)
實(shí)驗(yàn)四十四 無虹膜癥的基因診斷(113)
實(shí)驗(yàn)四十五 重組人干擾素的制備(114)
第六篇 自設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)四十六 奶粉中蛋白質(zhì)含量測(cè)定(116)
實(shí)驗(yàn)四十七 果蔬維生素C含量測(cè)定(116)
實(shí)驗(yàn)四十八 血清淀粉酶活性測(cè)定(117)
實(shí)驗(yàn)四十九 親子關(guān)系的鑒定(118)
實(shí)驗(yàn)五十 2型糖尿病的基因多態(tài)性檢測(cè)(119)
實(shí)驗(yàn)五十一 轉(zhuǎn)基因小鼠基因型鑒定(119)
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