應(yīng)用微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
全書(shū)分為概述、微生物實(shí)驗(yàn)和附錄三部分。概述主要講述微生物實(shí)驗(yàn)課程開(kāi)設(shè)的目的與意義、相關(guān)實(shí)驗(yàn)記錄與報(bào)告的規(guī)范、實(shí)驗(yàn)室規(guī)則及安全注意事項(xiàng)、生物安全等內(nèi)容。實(shí)驗(yàn)部分精選了微生物實(shí)驗(yàn)的無(wú)菌環(huán)境和操作,微生物實(shí)驗(yàn)的重要儀器,顯微鏡使用和形態(tài)學(xué)觀(guān)察,微生物的培養(yǎng)、分離及生長(zhǎng),微生物遺傳學(xué)技術(shù),分子生物學(xué)技術(shù),微生物檢測(cè)和鑒定,微生物技術(shù)的應(yīng)用等相關(guān)內(nèi)容的實(shí)驗(yàn)。附錄內(nèi)容包括常用染色液的配制、常用培養(yǎng)基配方、常用緩沖液的配制。
全書(shū)分為概述、微生物實(shí)驗(yàn)和附錄三部分。概述主要講述微生物實(shí)驗(yàn)課程開(kāi)設(shè)的目的與意義、相關(guān)實(shí)驗(yàn)記錄與報(bào)告的規(guī)范、實(shí)驗(yàn)室規(guī)則及安全注意事項(xiàng)、生物安全等內(nèi)容。實(shí)驗(yàn)部分精選了微生物實(shí)驗(yàn)的無(wú)菌環(huán)境和操作,微生物實(shí)驗(yàn)的重要儀器,顯微鏡使用和形態(tài)學(xué)觀(guān)察,微生物的培養(yǎng)、分離及生長(zhǎng),微生物遺傳學(xué)技術(shù),分子生物學(xué)技術(shù),微生物檢測(cè)和鑒定,微生物技術(shù)的應(yīng)用等相關(guān)內(nèi)容的實(shí)驗(yàn)。既有涉及對(duì)加強(qiáng)學(xué)生微生物實(shí)驗(yàn)基本操作和技能的傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn),也有一些設(shè)計(jì)型和綜合型實(shí)驗(yàn)。這些實(shí)驗(yàn)既可以單獨(dú)進(jìn)行,也可以組合起來(lái)成為綜合型實(shí)驗(yàn),便于安排教學(xué)。附錄內(nèi)容包括常用染色液的配制、常用培養(yǎng)基配方、常用緩沖液的配制,可供讀者參考。
本書(shū)以綜合性大學(xué)、師范、醫(yī)藥和農(nóng)林院校有關(guān)專(zhuān)業(yè)的大學(xué)本科生為對(duì)象,在編寫(xiě)的時(shí)候總結(jié)了編者三十多年的微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)經(jīng)驗(yàn)及學(xué)生參加工作后的反饋建議,注重操作細(xì)節(jié)的描述,以實(shí)現(xiàn)操作的可重復(fù)性。本書(shū)也可供其他微生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)工作者參考。同時(shí)本書(shū)在每個(gè)實(shí)驗(yàn)中都設(shè)計(jì)了預(yù)習(xí)思考題,以幫助學(xué)生對(duì)理論課上學(xué)到的知識(shí)進(jìn)行總結(jié)歸納,將實(shí)驗(yàn)知識(shí)與理論教學(xué)更好地聯(lián)系在一起。本書(shū)可作為微生物實(shí)驗(yàn)課程的教材,也可以作為微生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)的工具書(shū)。
本書(shū)第一章、第四
葉蕊芳,上海梅隴路130號(hào)華東理工大學(xué)259信箱,教授。
1.微生物學(xué),1990年至今,本科生,48,華東理工大學(xué)
2.微生物學(xué)實(shí)驗(yàn),1990年至今,本科生,32,華東理工大學(xué)
3.生命科學(xué)導(dǎo)論,2000年至2005年,32,華東理工大學(xué)
概述1
第一章微生物實(shí)驗(yàn)的無(wú)菌環(huán)境和操作5
第一節(jié)微生物實(shí)驗(yàn)的無(wú)菌環(huán)境5
一、無(wú)菌室5
二、超凈工作臺(tái)6
三、環(huán)境無(wú)菌檢測(cè)的方法8
第二節(jié)微生物實(shí)驗(yàn)的無(wú)菌操作14
一、無(wú)菌操作前的準(zhǔn)備工作14
二、滅菌和消毒方法14
第二章微生物實(shí)驗(yàn)的重要儀器23
一、普通光學(xué)顯微鏡23
二、高壓蒸汽滅菌鍋24
三、 移液器25
四、電子天平27
五、 pH計(jì)28
六、分光光度計(jì)29
七、超凈工作臺(tái)30
八、恒溫培養(yǎng)箱30
九、搖瓶培養(yǎng)設(shè)備30
十、冰箱及超低溫冰箱31
十一、離心機(jī)32
十二、真空冷凍干燥機(jī)33
十三、PCR儀34
十四、 厭氧培養(yǎng)箱35
十五、生物安全柜36
十六、電熱恒溫干燥箱37
第三章顯微鏡使用和形態(tài)學(xué)觀(guān)察39
實(shí)驗(yàn)一普通光學(xué)顯微鏡的使用41
實(shí)驗(yàn)二暗視野顯微鏡的使用47
實(shí)驗(yàn)三相差顯微鏡的使用50
實(shí)驗(yàn)四微分干涉差顯微鏡的使用53
實(shí)驗(yàn)五熒光顯微鏡的使用56
實(shí)驗(yàn)六微生物大小測(cè)定59
實(shí)驗(yàn)七微生物的形態(tài)觀(guān)察63
實(shí)驗(yàn)八微生物染色技術(shù)66
第四章微生物的培養(yǎng)、分離及生長(zhǎng)72
實(shí)驗(yàn)九培養(yǎng)基的配制和高壓蒸汽滅菌73
實(shí)驗(yàn)十微生物的接種分離和純培養(yǎng)78
實(shí)驗(yàn)十一亨蓋特法厭氧培養(yǎng)基的制備82
實(shí)驗(yàn)十二厭氧微生物的分離培養(yǎng)86
實(shí)驗(yàn)十三噬菌體的分離純化和效價(jià)測(cè)定90
實(shí)驗(yàn)十四微生物的計(jì)數(shù)——血細(xì)胞計(jì)數(shù)法93
實(shí)驗(yàn)十五微生物的計(jì)數(shù)——平板活菌計(jì)數(shù)法96
實(shí)驗(yàn)十六比濁法測(cè)定細(xì)菌生長(zhǎng)曲線(xiàn)99
實(shí)驗(yàn)十七干重和濕重法測(cè)定微生物的生長(zhǎng)量102
第五章微生物遺傳學(xué)技術(shù)104
實(shí)驗(yàn)十八微生物的誘變和突變株的篩選105
實(shí)驗(yàn)十九營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株的選育108
實(shí)驗(yàn)二十菌種保藏技術(shù)112第六章分子生物學(xué)技術(shù)119
一、目的基因的獲得119
二、載體系統(tǒng)的選擇119
三、目的基因與載體的重組119
四、重組載體引入受體細(xì)胞120
五、重組受體細(xì)胞的篩選和鑒定120
六、目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)120
實(shí)驗(yàn)二十一細(xì)菌總DNA的提取和瓊脂糖凝膠電泳121
實(shí)驗(yàn)二十二基本PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA片段124
實(shí)驗(yàn)二十三堿裂解法和試劑盒法提取質(zhì)粒DNA126
實(shí)驗(yàn)二十四DNA分子的限制性?xún)?nèi)切酶消化、片段純化、連接130
實(shí)驗(yàn)二十五感受態(tài)細(xì)胞的制備133
實(shí)驗(yàn)二十六重組DNA轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞135
第七章微生物檢測(cè)和鑒定137
實(shí)驗(yàn)二十七微生物的營(yíng)養(yǎng)及生理生化反應(yīng)138
實(shí)驗(yàn)二十八應(yīng)用API20E細(xì)菌鑒定系統(tǒng)鑒定腸桿菌科和部分其他革蘭氏陰性桿菌142
實(shí)驗(yàn)二十九以細(xì)菌16S rRNA序列和真菌ITS序列為基礎(chǔ)的菌種鑒定146
第八章微生物技術(shù)的應(yīng)用150
實(shí)驗(yàn)三十土壤中纖維素分解菌的分離151
實(shí)驗(yàn)三十一食品樣品中菌落總數(shù)的測(cè)定159
實(shí)驗(yàn)三十二食品樣品中大腸菌群MPN值的測(cè)定161
實(shí)驗(yàn)三十三原生質(zhì)體的制備167
實(shí)驗(yàn)三十四原生質(zhì)體的融合169
附錄Ⅰ常用染色液的配制171
附錄Ⅱ常用培養(yǎng)基配方173
附錄Ⅲ常用緩沖液的配制176
參考文獻(xiàn)178