本教材以職業(yè)能力培養(yǎng)為重點,將檢驗分析崗位中涉及的常用儀器分析方法分成光學(xué)分析法、電化學(xué)分析法、色譜分析法、其他分析法四個模塊十個項目,再將各項目按生產(chǎn)的實際要求分解成若干任務(wù)。其基本框架為:必備知識、拓展知識、實踐操作、項目小結(jié)、思考與練習(xí)等。其中實踐項目以目前檢測分析行業(yè)中常用的實際任務(wù)作為案例進(jìn)行實訓(xùn)。
本書是生物技術(shù)、食品藥品、藥學(xué)、藥物分析、資源、環(huán)境保護(hù)、糧食等類專業(yè)的必修課教材,同時可供相關(guān)專業(yè)的學(xué)生和技術(shù)人員參考。
《高職高專'十二五'規(guī)劃教材:現(xiàn)代儀器分析》是生物技術(shù)、食品藥品、藥學(xué)、藥物分析、資源、環(huán)境保護(hù)、糧食等類專業(yè)的必修課教材,同時可供相關(guān)專業(yè)的學(xué)生和技術(shù)人員參考。
緒論
模塊一光學(xué)分析法
項目一紫外可見分光光度法/8
任務(wù)一紫外 部杉 分光光度計的基本操作9
必備知識9
一、紫外 部杉 分光光度法的原理9
二、常見的紫外 部杉 分光光度計17
※實踐操作常見紫外 部杉 分光光度計的使用、維護(hù)及保養(yǎng)21
任務(wù)二紫外 部杉 分光光度法的應(yīng)用25
※必備知識25
一、紫外 部杉 分光光度法的應(yīng)用之一――定量分析25
二、紫外 部杉 分光光度法的應(yīng)用之二――定性分析31
※拓展知識紫外 部杉 分光光度法應(yīng)用的進(jìn)展33
一、固體樣品可直接進(jìn)行測量33
二、微型光纖分光光度計的使用擴大了分光光度計的應(yīng)用范圍33
三、聯(lián)用技術(shù)提升分光光度法的效果34
※實踐操作一樣品中亞硝酸鹽含量的測定(參考GB/T500933―2008)34
※實踐操作二飲料中苯甲酸含量的測定(參考GB/T12289―90)36
【項目小結(jié)】38
【思考與練習(xí)】38
項目二原子吸收光譜法/41
任務(wù)一原子吸收分光光度計的基本操作42
※必備知識42
一、原子吸收光譜法概述42
二、原子吸收分光光度計的結(jié)構(gòu)及工作原理46
三、原子吸收分光光度計的類型52
※實踐操作常見原子吸收分光光度計的使用、維護(hù)與保養(yǎng)53
任務(wù)二原子吸收光譜法的應(yīng)用55
※必備知識55
一、試樣的制備55
二、標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液的配制57
三、測量條件的選擇57
四、定量方法60
五、干擾及其消除63
※拓展知識原子熒光光譜法68
一、原子熒光光譜法概述68
二、原子熒光光譜分析的基本原理68
三、原子熒光分光光度計69
四、原子吸收光譜法與原子熒光光譜法的比較70
※實踐操作一原子吸收法測定葡萄糖酸鋅口服液中鋅含量70
※實踐操作二原子吸收法測定自來水中鈣的含量72
【項目小結(jié)】73
【思考與練習(xí)】73
項目三紅外吸收光譜分析法/75
任務(wù)紅外吸收光譜儀的使用75
※必備知識75
一、概述75
二、物質(zhì)產(chǎn)生紅外吸收光譜的原因76
三、認(rèn)識傅里葉紅外光譜儀86
※實踐操作傅里葉變換紅外光譜儀的結(jié)構(gòu)、原理及使用87
【項目小結(jié)】88
【思考與練習(xí)】89
模塊二電化學(xué)分析法
項目四電位分析法/94
任務(wù)一直接電位法的應(yīng)用94
※必備知識94
一、電位分析法的理論依據(jù)94
二、酸度計的基本構(gòu)造及使用99
三、離子選擇性電極的定量方法100
四、離子計的基本構(gòu)造及使用100
五、直接電位法測定溶液pH的原理101
六、直接電位法測定離子活(濃)度的原理101
※拓展知識pH計在藥物分析中的應(yīng)用102
※實踐操作一水溶液pH的測定102
※實踐操作二離子選擇性電極法測牙膏中氟離子的含量104
任務(wù)二電位滴定分析法及其應(yīng)用105
※必備知識105
一、電位滴定原理105
二、電位滴定裝置及其使用105
三、電位滴定法如何確定滴定終點105
四、電位滴定法的特點106
五、電位滴定法的應(yīng)用106
※實踐操作電位滴定法測定氯化鈉注射液的含量測定107
任務(wù)三永停滴定分析法及其應(yīng)用109
※必備知識109
一、永停滴定法的基本原理109
二、永停滴定儀110
※實踐操作對氨基苯磺酸鈉的含量測定(永停滴定法)111
【項目小結(jié)】113
【思考與練習(xí)】113
模塊三色譜分析法
項目五氣相色譜法/118
任務(wù)一氣相色譜儀的使用與維護(hù)118
※必備知識118
一、色譜分析概述118
二、色譜流出曲線和術(shù)語119
三、氣相色譜基本理論121
四、氣相色譜儀的構(gòu)造124
※實踐操作常見氣相色譜儀的操作128
任務(wù)二氣相色譜的定性分析131
※必備知識131
一、樣品的采集與處理131
二、分離操作條件的選擇132
三、定性分析135
※實踐操作白酒中微量成分的定性分析136
任務(wù)三氣相色譜的定量分析――外標(biāo)分析法137
※必備知識137
※實踐操作一外標(biāo)法測定食品中苯甲酸和山梨酸的含量138
※實踐操作二面粉中增白劑含量的測定140
任務(wù)四氣相色譜的定量分析――內(nèi)標(biāo)法141
※必備知識141
※實踐操作內(nèi)標(biāo)法測定八角茴香油中茴香腦的含量142
任務(wù)五氣相色譜的定量分析――歸一化法143
※必備知識143
※實踐操作歸一化法測定丁醇異構(gòu)體的含量144
【項目小結(jié)】145
【思考與練習(xí)】145
項目六高效液相色譜法/147
任務(wù)一高效液相色譜儀的使用147
※必備知識147
一、液相色譜概述147
二、高效液相色譜基本理論148
三、高效液相色譜的主要類型及其分離原理152
四、高效液相色譜儀的基本構(gòu)造156
※實踐操作高效液相色譜儀的使用及維護(hù)與保養(yǎng)162
任務(wù)二高效液相色譜法的分析方法168
※必備知識168
一、高效液相色譜法的實驗技術(shù)168
二、高效液相色譜法的應(yīng)用170
※實踐操作一原料乳與乳制品中三聚氰胺的測定172
※實踐操作二水產(chǎn)品中諾氟沙星、鹽酸環(huán)丙沙星、恩諾沙星殘留量的測定175
※實踐操作三食品中蘇丹紅染料的殘留量測定177
【項目小結(jié)】180
【思考與練習(xí)】180
項目七平面色譜法/182
任務(wù)薄層色譜法的應(yīng)用182
※必備知識182
一、平面色譜法的基本原理182
二、薄層色譜操作技術(shù)184
三、紙色譜法188
※拓展知識189
一、高效薄層色譜法189
二、薄層掃描法189
※實踐操作一薄層色譜法分離鑒定復(fù)方磺胺甲唑片中SMZ及TMP190
※實踐操作二食品中苯甲酸、山梨酸的測定192
【項目小結(jié)】194
【思考與練習(xí)】194
項目八離子色譜法/195
任務(wù)一離子色譜儀的使用195
※必備知識195
一、離子色譜法的原理195
二、離子色譜儀的構(gòu)造198
※實踐操作常見離子色譜儀的操作規(guī)范及維護(hù)保養(yǎng)201
任務(wù)二離子色譜法的應(yīng)用202
※必備知識202
一、去離子水的制備及溶液配制202
二、流動相的選擇203
三、離子色譜樣品預(yù)處理技術(shù)203
四、定性方法203
五、定量方法204
六、離子色譜法的應(yīng)用204
※拓展知識205
一、離子交換色譜法(IEC)205
二、離子排斥色譜法206
三、離子對色譜法206
※實踐操作一啤酒中一價陽離子的定量分析206
※實踐操作二離子色譜法測定水樣中常見陰離子含量208
【項目小結(jié)】211
【思考與練習(xí)】211
模塊四其他儀器分析方法
項目九質(zhì)譜法/214
任務(wù)質(zhì)譜法及其應(yīng)用215
※必備知識215
一、質(zhì)譜分析的基本原理215
二、質(zhì)譜儀216
三、質(zhì)譜圖的定性定量分析218
【項目小結(jié)】222
【思考與練習(xí)】223
項目十儀器聯(lián)用技術(shù)/224
任務(wù)一氣質(zhì)聯(lián)用224
※必備知識224
一、氣質(zhì)聯(lián)用的優(yōu)勢224
二、氣質(zhì)聯(lián)用要解決的問題225
三、氣質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)的組成226
四、氣質(zhì)聯(lián)用常用的測定方法227
五、氣質(zhì)聯(lián)用的應(yīng)用227
任務(wù)二液相色譜 倉勢琢 用228
※必備知識228
一、HPLCMS聯(lián)用技術(shù)的優(yōu)勢228
二、HPLCMS聯(lián)用技術(shù)原理228
三、HPLCMS聯(lián)用技術(shù)的主要應(yīng)用231
【項目小結(jié)】232
【思考與練習(xí)】232
參考文獻(xiàn)/233
在強脈沖供電時,除增強共振輻射譜線的強度外,空心陰極燈的陰極被濺射出大量基態(tài)原子,這些基態(tài)原子對陰極的特征譜線產(chǎn)生共振吸收,致使空心陰極燈特征輻射譜線的輪廓發(fā)生自吸變寬,使其中心波長位置凹入,與原子吸收線之間相互作用產(chǎn)生的吸光度值大幅度小于弱脈沖供電的情況,即在測量背景吸收的同時,也測量到一部分原子吸收。而在弱脈沖時,兩者測量到的背景吸收相同。
空心陰極燈自吸背景校正裝置的主要優(yōu)點:一是裝置簡單,除燈電流控制電路及軟件外不需要任何的光機結(jié)構(gòu);二是背景校正可在整個波段范圍(190~900nm)內(nèi)實施;三是用同一支空心陰極燈測量原子吸收及背景吸收,樣品光束與參比光束完全相同,校正精度很高。但是,該方法同時也存在一些不足:一是不是所有的空心陰極燈都能產(chǎn)生良好的自吸發(fā)射譜線。一些低熔點的元素在很低的電流下即產(chǎn)生自吸,一些高熔點元素在很高的電流下也不產(chǎn)生自吸,對這樣一些元素測定,靈敏度損失嚴(yán)重,甚至不能測定。二是由于空心陰極燈的輻射相對供電脈沖有延遲,為在自吸后能返回到正常狀態(tài),調(diào)制頻率不宜太高。
(3)塞曼效應(yīng)背景校正技術(shù) 1896年,荷蘭科學(xué)家塞曼(Pieter Zeeman)發(fā)現(xiàn),當(dāng)把產(chǎn)生光譜的光源置于高達(dá)幾千高斯的磁場中時,光源輻射的每條譜線分裂成幾條偏振化的分線,這種磁致譜線分裂現(xiàn)象稱為塞曼效應(yīng)。利用這種效應(yīng)進(jìn)行背景扣除校正,稱為塞曼效應(yīng)背景校正技術(shù)。塞曼效應(yīng)調(diào)制有兩種類型,直接塞曼調(diào)制(光源調(diào)制)和倒塞曼調(diào)制(吸收線調(diào)制)。前者是指光源在磁場中使發(fā)射線發(fā)生分裂。后者是指原子化器在磁場中使吸收線發(fā)生分裂。磁場方向若與光束方向垂直,則為橫向塞曼調(diào)制,磁場方向與光束方向平行,則為縱向塞曼調(diào)制。根據(jù)磁場的性質(zhì),又可分為恒定磁場調(diào)制和交變磁場調(diào)制兩種。目前,大部分商品化儀器將塞曼效應(yīng)施加于原子化器,應(yīng)用較多的有橫向恒定磁場塞曼調(diào)制、橫向交變磁場塞曼調(diào)制及縱向交變磁場塞曼調(diào)制。其中,縱向交變磁場塞曼調(diào)制效果最好,它無需偏振器,能量損失最小,在磁場足夠大時不影響檢出限等指標(biāo)。
3.物理干擾及其消除
物理干擾是指試樣在轉(zhuǎn)移、蒸發(fā)和原子化過程中由于試樣溶液的黏度、表面張力、密度等的差異變化而引起的干擾。在火焰原子吸收光譜法中,這些物理特性的變化引起試液噴霧速度、氣溶膠大小及其傳送效率等發(fā)生了變化,從而引起吸收強度的變化。在石墨爐原子吸收光譜法中,物理性質(zhì)的差別會引起揮發(fā)速度的差異,尤其是高含鹽量的樣品差異更加顯著,引起試樣在石墨爐內(nèi)的散布情況不同,從而引起吸收峰的開關(guān)和高度。這種物理干擾是非選擇性干擾,對試樣中各分析元素的影響是相同的。