目錄
第一章基因載體概論 1
第一節(jié)基因工程與基因載體 1
第二節(jié)基因載體分類 2
一、按照功能分類 2
二、按照來源分類 4
三、按照是否整合分類 5
四、按照目的分類 6
第三節(jié)基因載體結構 6
一、質粒載體結構 6
二、噬菌體載體結構 11
三、噬菌粒載體結構 13
四、黏粒載體結構 15
五、人工染色體載體結構 15
六、病毒載體結構 16
第四節(jié)基因表達系統(tǒng) 17
總結與展望 17
參考文獻 18
第二章原核表達載體 20
第一節(jié)原核表達系統(tǒng)概述 20
一、原核表達系統(tǒng)歷史 20
二、原核表達系統(tǒng)組成 21
三、原核表達系統(tǒng)應用 22
第二節(jié)原核表達載體結構與功能 23
一、原核表達載體分類 23
二、原核表達載體結構 24
三、常用原核表達載體 31
第三節(jié)原核表達載體優(yōu)化 35
一、載體骨架結構優(yōu)化 35
二、其他優(yōu)化策略 37
總結與展望 40
參考文獻 40
第三章酵母表達載體 43
第一節(jié)酵母表達系統(tǒng)概述 43
一、酵母表達系統(tǒng)歷史 43
二、酵母表達系統(tǒng)組成 44
三、酵母表達系統(tǒng)應用 49
第二節(jié)酵母表達載體結構與功能 52
一、酵母表達載體分類 52
二、酵母表達載體結構 57
三、常用酵母表達載體 65
第三節(jié)酵母表達載體優(yōu)化 68
一、載體骨架結構優(yōu)化 68
二、其他優(yōu)化策略 71
總結與展望 73
參考文獻 73
第四章昆蟲表達載體 79
第一節(jié)昆蟲表達系統(tǒng)概述 79
一、昆蟲表達系統(tǒng)歷史 79
二、昆蟲表達系統(tǒng)組成 80
三、昆蟲表達系統(tǒng)應用 83
第二節(jié)昆蟲表達載體結構與功能 87
一、昆蟲表達載體分類 87
二、昆蟲表達載體結構 91
三、常用昆蟲表達載體 92
第三節(jié)昆蟲表達載體優(yōu)化 94
一、載體骨架結構優(yōu)化 94
二、其他優(yōu)化策略 106
總結與展望 107
參考文獻 107
第五章哺乳動物表達載體 111
第一節(jié)哺乳動物表達系統(tǒng)概述 111
一、哺乳動物表達系統(tǒng)歷史 111
二、哺乳動物表達系統(tǒng)組成 113
三、哺乳動物表達系統(tǒng)應用 117
第二節(jié)哺乳動物表達載體結構與功能 118
一、哺乳動物表達載體分類 118
二、哺乳動物表達載體結構 119
三、常用哺乳動物表達載體 124
第三節(jié)哺乳動物質粒載體優(yōu)化 131
一、載體骨架結構優(yōu)化 131
二、其他優(yōu)化策略 142
總結與展望 149
參考文獻 150
第六章病毒表達載體 154
第一節(jié)基因治療表達系統(tǒng)概述 154
一、基因治療歷史 154
二、基因治療表達系統(tǒng)組成 155
第二節(jié)腺病毒表達載體結構與應用 157
一、腺病毒表達載體結構 157
二、腺病毒表達載體優(yōu)化 160
三、腺病毒表達載體應用 161
第三節(jié)腺相關病毒表達載體結構與應用 162
一、腺相關病毒表達載體結構 163
二、腺相關病毒表達載體優(yōu)化 164
三、腺相關病毒表達載體應用 165
第四節(jié)逆轉錄病毒表達載體結構與應用 166
一、逆轉錄病毒表達載體結構 167
二、逆轉錄病毒表達載體優(yōu)化 168
三、逆轉錄病毒表達載體應用 169
第五節(jié)慢病毒表達載體結構與應用 170
一、慢病毒表達載體結構 170
二、慢病毒表達載體優(yōu)化 172
三、慢病毒表達載體應用 172
總結與展望 173
參考文獻 174
第七章植物表達載體 177
第一節(jié)植物表達系統(tǒng)概述 177
一、植物表達系統(tǒng)歷史 177
二、植物表達系統(tǒng)組成 179
三、植物表達系統(tǒng)應用 180
第二節(jié)植物表達載體結構與功能 183
一、植物表達載體分類 183
二、植物表達載體結構 187
三、常用植物表達載體 196
第三節(jié)植物表達載體的優(yōu)化 201
一、載體骨架結構優(yōu)化 201
二、其他優(yōu)化策略 212
總結與展望 215
參考文獻 215
第八章人工染色體載體 220
第一節(jié)人工染色體載體概述 220
一、人工染色體載體歷史 220
二、人工染色體載體應用 221
第二節(jié)人工染色體載體結構與功能 226
一、人工染色體載體分類 226
二、人工染色體載體結構 226
三、常用人工染色體載體 232
第三節(jié)人工染色體載體優(yōu)化 237
一、載體骨架結構優(yōu)化 237
二、其他優(yōu)化策略 238
總結與展望 239
參考文獻 239
第九章基因編輯載體 242
第一節(jié)基因編輯系統(tǒng)概述 242
一、基因編輯系統(tǒng)歷史 242
二、基因編輯系統(tǒng)組成 244
三、基因編輯系統(tǒng)應用 246
第二節(jié) CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)結構與功能 250
一、CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)分類 251
二、CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)結構 251
三、常用 CRISPR/Cas9基因編輯載體 255
第三節(jié) CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)優(yōu)化 256
一、合理設計 sgRNA分子 257
二、設計 Cas9突變體及其類似物 259
三、調節(jié) sgRNA-Cas9復合物濃度 263
四、選擇合適遞送系統(tǒng) 264
五、調控細胞修復通路 266
總結與展望 267
參考文獻 267
第十章基因表達載體操作實例 271
第一節(jié)原核表達載體操作實例 271
一、材料 271
二、方法 272
三、注意事項 280
第二節(jié)昆蟲表達載體操作實例 280
一、材料 280
二、方法 281
三、注意事項 284
第三節(jié)植物表達載體操作實例 285
一、材料 285
二、方法 285
三、注意事項 288
第四節(jié)哺乳動物表達載體操作實例 288
一、材料 288
二、方法 289
三、注意事項 291
第五節(jié) CRISPR/Cas9基因編輯操作實例 292
一、材料 292
二、方法 293
三、注意事項 298
總結與展望 298
參考文獻 299
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