本書通過總述、分述,再總述介紹了嗜尸性蠅類分子鑒定的應用發(fā)展狀況、蠅類DNA提取的評價、分子標記的選擇以及未來分子鑒定的趨勢等內容,是一本基礎理論與實踐并重的實用工具書。
盡管傳統(tǒng)的形態(tài)學分類仍舊被廣泛應用,但分子生物學的快速發(fā)展給嗜尸性蠅類的種屬鑒定提供了新的契機,它能夠在基因水平上對物種進行快速有效的鑒別,同時還可以探討昆蟲的系統(tǒng)發(fā)育學特點。
本書共七章,基于以線粒體和核基因為主的條形碼技術為嗜尸性蠅類分子鑒定的研究熱點,將分子與形態(tài)學鑒定相結合,為嗜尸性蠅類種屬鑒定提供更準確、可靠的參考依據(jù)。隨著測序成本的降低,目前GenBank數(shù)據(jù)庫中常見嗜尸性蠅類的參考序列已基本覆蓋,因此分子鑒定將被廣泛應用于實際案件中。
2020年,在司法部《法醫(yī)類司法鑒定執(zhí)業(yè)分類規(guī)定》(司規(guī)〔2020〕3號)中,已經(jīng)明確將法醫(yī)昆蟲學列至第二章法醫(yī)病理鑒定條款中。該文件的頒布,使昆蟲學證據(jù)終于能夠合法有效地用于法庭審判階段,法醫(yī)昆蟲學研究和應用也必將迎來新一輪高潮。
隨著法醫(yī)昆蟲學的不斷發(fā)展,應用嗜尸性昆蟲的生長發(fā)育規(guī)律和尸體上昆蟲演替規(guī)律推斷死亡時間成為可能,但這要求快速、準確地鑒別嗜尸性昆蟲的種屬。分子生物學的快速發(fā)展為嗜尸性蠅類種屬鑒定提供了新的途徑,經(jīng)過大量的嘗試與探索,特別是近十幾年來,國內研究者在全國不同地域采集蠅類標本進行序列分析研究,在提取方法、基因片段種屬鑒定效果、種屬鑒定應用等方面取得了較大的研究成果。
本書根據(jù)國內相關記錄和研究,結合本人科研實踐,對進行過分子鑒定的蠅種、地區(qū)及采用的分子標記進行闡述,同時以蠅類分子鑒定中的關鍵點單獨建立章節(jié),以期為我國嗜尸性蠅類的種屬鑒定提供基礎方法,促進法醫(yī)昆蟲學的發(fā)展和應用。
翟仙敦
2021年11月
翟仙敦,河南科技大學,副院長、副教授,從事法醫(yī)昆蟲學分子鑒定研究多年,主持該領域河南省科技廳項目1項,河南省教育廳項目一項。昆蟲研究方向,已經(jīng)畢業(yè)研究生5名。發(fā)表該領域論文10篇,授權發(fā)明專利1項,實用新型專利1項。
1.河南省基礎與前沿課題(112300410082)嗜尸性蠅類種屬鑒定新遺傳標記及其突變規(guī)律研究,已結題,主持。
2.河南省高等學校重點科研項目(18B310002)河南地區(qū)嗜尸性蠅類全線粒體基因組檢測分析及地區(qū)數(shù)據(jù)庫的建立,已結題,主持。
章我國嗜尸性蠅類分子鑒定的研究現(xiàn)狀與分析1
一、研究背景1
二、嗜尸性蠅類用于推斷PMI的瓶頸3
三、分子生物學鑒定4
四、研究現(xiàn)狀及分析8
五、展望12
參考文獻13
第二章嗜尸性蠅類DNA提取16
節(jié)材料與方法17
一、主要試劑及儀器17
二、實驗方法17
第二節(jié)提取方法的結果21
一、DNA濃度和純度檢測結果21
二、電泳檢測結果22
三、PCR產(chǎn)物電泳檢測結果22
第三節(jié)提取方法的分析與評價23
參考文獻25
第三章常用嗜尸性蠅類分子標記27
節(jié)線粒體DNA分子標記28
一、線粒體細胞色素氧化輔酶Ⅰ29
二、線粒體細胞色素氧化輔酶Ⅱ34
三、16S rDNA35
第二節(jié)核DNA分子標記37
一、ITS238
二、28S rRNA40
第三節(jié)其他遺傳標記41
參考文獻42
第四章洛陽地區(qū)嗜尸性蠅類的分子鑒定44
節(jié)兩種基因片段用于分析嗜尸性麗蠅45
一、材料與方法45
二、結果47
三、小結57
第二節(jié)兩種基因片段分析常見嗜尸性麻蠅58
一、材料與方法59
二、結果59
三、小結66
參考文獻68
第五章常見近緣種的分子生物學研究70
節(jié)嗜尸性麗蠅的ITS2基因序列分析71
一、材料與方法71
二、結果73
三、小結78
第二節(jié)近緣種銅綠蠅和絲光綠蠅ITS2基因序列分析80
一、材料與方法80
二、結果80
三、小結82
第三節(jié)多分子標記對叉葉綠蠅和亮綠蠅的序列分析87
一、材料與方法88
二、結果92
三、小結101
參考文獻103
第六章嗜尸性蠅類序列分析的法醫(yī)學意義105
節(jié)嗜尸性蠅類與死亡時間推斷105
第二節(jié)嗜尸性蠅類與死亡地點推斷110
參考文獻114
第七章基于CNKI的嗜尸性蠅類文獻分析117
一、研究過程與分析117
二、研究結論與啟示124
參考文獻125