本書(shū)基于作者近10年對(duì)胡楊(PopuluseuphraticaOliv.)和灰楊(PopuluspruinosaSchrenk)抗旱生理的研究工作,系統(tǒng)介紹了兩個(gè)物種種子萌發(fā)階段、幼苗階段和成年植株階段對(duì)干旱脅迫的生理響應(yīng),闡明兩物種生活史不同時(shí)期的生理生態(tài)適應(yīng)策略。通過(guò)對(duì)干旱脅迫條件下胡楊幼苗的表達(dá)譜分析,預(yù)測(cè)篩選其中13個(gè)表達(dá)模式與表達(dá)譜結(jié)果一致的抗旱候選基因,并對(duì)Pe866和Pe9078基因進(jìn)行克隆和功能驗(yàn)證,揭示胡楊苗期抗旱的分子調(diào)控機(jī)制,對(duì)發(fā)掘利用抗旱相關(guān)基因有重要的理論指導(dǎo)和實(shí)踐意義。
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目錄
第1章 概述 1
1.1 分類(lèi)地位 1
1.2 地理分布 1
1.2.1 胡楊地理分布 1
1.2.2 灰楊地理分布 3
1.3 形態(tài)學(xué)特性 4
1.3.1 胡楊形態(tài)學(xué)特性 4
1.3.2 灰楊形態(tài)學(xué)特性 4
1.4 繁殖特性 5
1.4.1 胡楊繁殖特性 5
1.4.2 灰楊繁殖特性 6
1.5 生長(zhǎng)特性 7
1.6 生態(tài)學(xué)特性 8
1.6.1 胡楊生態(tài)學(xué)特性 8
1.6.2 灰楊生態(tài)學(xué)特性 10
1.7 胡楊、灰楊響應(yīng)干旱脅迫的研究進(jìn)展 11
1.7.1 胡楊、灰楊種子萌發(fā)對(duì)干旱脅迫的響應(yīng) 11
1.7.2 胡楊、灰楊生理特性對(duì)干旱脅迫的響應(yīng) 11
1.7.3 胡楊、灰楊抗旱的分子機(jī)制研究現(xiàn)狀 14
參考文獻(xiàn) 16
第2章 種子萌發(fā)對(duì)干旱脅迫的響應(yīng) 22
2.1 材料與方法 23
2.2 種子萌發(fā)特性 24
2.3 溫度和光照對(duì)胚生長(zhǎng)的影響 28
2.4 干旱脅迫對(duì)種子萌發(fā)的影響 34
2.5 干旱脅迫對(duì)胚生長(zhǎng)的影響 36
2.6 討論 38
2.6.1 種子萌發(fā)對(duì)溫度、光照變化的響應(yīng)特征 38
2.6.2 種子萌發(fā)對(duì)干旱脅迫的響應(yīng) 40
參考文獻(xiàn) 40
第3章 幼齡植株對(duì)干旱脅迫的生理響應(yīng) 43
3.1 材料與方法 44
3.1.1 一年生幼苗干旱脅迫試驗(yàn) 44
3.1.2 兩年生幼樹(shù)干旱脅迫試驗(yàn) 46
3.1.3 三年生幼樹(shù)干旱脅迫試驗(yàn) 49
3.1.4 數(shù)據(jù)分析 49
3.2 幼苗對(duì)干旱脅迫的生理生化響應(yīng) 49
3.2.1 干旱脅迫對(duì)幼苗超氧化物歧化酶活性的影響 49
3.2.2 干旱脅迫對(duì)幼苗過(guò)氧化物酶活性的影響 50
3.2.3 干旱脅迫對(duì)幼苗過(guò)氧化氫酶活性的影響 51
3.2.4 干旱脅迫對(duì)幼苗丙二醛含量的影響 51
3.2.5 干旱脅迫對(duì)幼苗葉綠素含量的影響 52
3.3 幼樹(shù)對(duì)干旱脅迫的生理生化響應(yīng) 53
3.3.1 干旱脅迫對(duì)幼樹(shù)滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的影響 53
3.3.2 干旱脅迫對(duì)幼樹(shù)保護(hù)酶活性的影響 56
3.3.3 干旱脅迫對(duì)幼樹(shù)丙二醛含量的影響 59
3.4 幼樹(shù)對(duì)干旱脅迫的光合生理響應(yīng) 60
3.4.1 干旱脅迫對(duì)幼樹(shù)光合生理指標(biāo)日變化的影響 60
3.4.2 干旱脅迫對(duì)幼樹(shù)光系統(tǒng)II 光化學(xué)效率的影響 70
3.4.3 幼樹(shù)葉綠素?zé)晒鈪?shù)對(duì)干旱脅迫的響應(yīng) 72
3.4.4 幼樹(shù)瞬時(shí)光合參數(shù)對(duì)干旱脅迫的響應(yīng) 75
3.4.5 干旱脅迫對(duì)幼苗光合作用-光響應(yīng)特性的影響 78
3.5 討論 84
3.5.1 胡楊幼苗對(duì)干旱脅迫的生理生化響應(yīng) 84
3.5.2 胡楊、灰楊幼樹(shù)抗逆性與其滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)和保護(hù)酶的關(guān)系 86
3.5.3 胡楊、灰楊幼樹(shù)對(duì)干旱脅迫的光合生理響應(yīng) 87
3.5.4 胡楊、灰楊幼樹(shù)對(duì)干旱脅迫的葉綠素?zé)晒馓匦皂憫?yīng) 89
參考文獻(xiàn) 90
第4章 成年植株對(duì)干旱脅迫的生理響應(yīng) 94
4.1 材料與方法 95
4.1.1 研究區(qū)概況 95
4.1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與方法 95
4.1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析 97
4.2 成年植株光合生理特性 98
4.2.1 凈光合速率、蒸騰速率、氣孔導(dǎo)度及水分利用效率的種間比較 98
4.2.2 光合速率與蒸騰速率的日變化 98
4.2.3 光響應(yīng)曲線(xiàn)的氣體交換參數(shù)比較 99
4.2.4 光合速率的日變化與胞間CO2濃度及氣孔限制的關(guān)系分析 100
4.2.5 光合速率、蒸騰速率對(duì)環(huán)境因子的響應(yīng) 100
4.3 成年植株水分生理特性 102
4.3.1 成年植株P(guān)-V曲線(xiàn)的主要水分參數(shù) 102
4.3.2 幼樹(shù)P-V曲線(xiàn)的主要水分參數(shù) 103
4.3.3 種間抗旱性比較 104
4.4 成年植株氣體交換特性對(duì)地下水位變化的響應(yīng) 105
4.4.1 不同地下水位條件下成年植株氣體交換特性 105
4.4.2 不同地下水位條件下水勢(shì)變化規(guī)律 107
4.5 成年植株葉綠素?zé)晒馓匦詫?duì)不同地下水位的響應(yīng) 110
4.5.1 晴天葉綠素?zé)晒馓匦缘娜兆兓?110
4.5.2 陰天葉綠素?zé)晒馓匦缘娜兆兓?111
4.6 討論 113
4.6.1 種間光合生理特性的比較 113
4.6.2 種間抗旱特性的比較 114
4.6.3 地下水位變化對(duì)胡楊、灰楊水勢(shì)的影響 115
4.6.4 地下水位變化對(duì)胡楊、灰楊熒光特性的影響 116
參考文獻(xiàn) 117
第5章 干旱脅迫下胡楊幼苗的轉(zhuǎn)錄組分析 120
5.1 材料與方法 120
5.1.1 幼苗期干旱脅迫處理 120
5.1.2 轉(zhuǎn)錄組測(cè)序的樣品制備 121
5.1.3 數(shù)據(jù)的質(zhì)量控制 121
5.2 研究結(jié)果 121
5.2.1 數(shù)據(jù)比對(duì)統(tǒng)計(jì) 121
5.2.2 測(cè)序飽和度分析 122
5.2.3 測(cè)序隨機(jī)性分析 122
5.2.4 差異表達(dá)基因統(tǒng)計(jì)及GO分析與KEGG分析 122
5.2.5 抗旱候選基因的篩選 127
5.3 抗旱相關(guān)基因的表達(dá)模式分析及功能預(yù)測(cè) 131
5.3.1 RNA質(zhì)量檢測(cè) 131
5.3.2 抗旱相關(guān)基因的檢測(cè)結(jié)果 131
5.3.3 抗旱相關(guān)基因編碼蛋白質(zhì)的功能預(yù)測(cè) 137
5.4 小結(jié)與討論 141
5.4.1 胡楊幼苗干旱脅迫轉(zhuǎn)錄組分析 141
5.4.2 胡楊抗旱候選基因的表達(dá)模式分析及功能預(yù)測(cè) 143
參考文獻(xiàn) 144
第6章 胡楊抗旱相關(guān)基因的克隆及功能驗(yàn)證 147
6.1 實(shí)驗(yàn)材料 148
6.1.1 植物材料 148
6.1.2 載體與菌株 148
6.1.3 試劑盒 148
6.2 研究方法 149
6.2.1 胡楊PeGRDL、PeDRP 和PeMTD基因的克隆 149
6.2.2 PCR 產(chǎn)物純化 149
6.2.3 PCR 產(chǎn)物連接pEASY-Blunt載體 149
6.2.4 大腸桿菌轉(zhuǎn)化 150
6.2.5 檢測(cè)陽(yáng)性克隆 150
6.2.6 質(zhì)粒提取 150
6.2.7 胡楊PeGRDL、PeDRP和PeMTD基因的測(cè)序驗(yàn)證 151
6.2.8 PeGRDL、PeDRP和PeMTD基因-酵母pYES2/CT重組表達(dá)載體的構(gòu)建 151
6.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 155
6.3.1 胡楊PeGRDL基因的克隆及功能分析 155
6.3.2 胡楊PeDRP基因的克隆與功能分析 162
6.3.3 胡楊PeMTD基因的克隆與功能分析 167
6.4 討論 175
參考文獻(xiàn) 176