目錄
前言
第一篇 實驗要求
第一章 生物化學實驗基本要求 1
第一節(jié) 生物化學實驗室學生實驗守則 1
第二節(jié) 生物化學實驗室安全管理 2
第三節(jié) 生物化學實驗報告格式要求 11
第二章 生物化學實驗操作規(guī)范 15
第一節(jié) 生物化學實驗常用器皿使用規(guī)范 15
第二節(jié) 生物化學實驗常用儀器使用規(guī)范 17
第二篇 生物化學實驗技術
第三章 生物大分子制備技術 22
第一節(jié) 蛋白質的制備 23
第二節(jié) 酶的制備 26
第三節(jié) 核酸的制備 29
第四節(jié) 多糖的制備 33
第四章 層析技術 38
第一節(jié) 層析技術的原理 38
第二節(jié) 層析的操作形式 50
第三節(jié) 高效液相色譜技術 57
第五章 離心技術 63
第一節(jié) 離心技術簡介 63
第二節(jié) 離心機的主要構造及使用 65
第六章 分光光度技術 70
第一節(jié) 分光光度技術的原理 70
第二節(jié) 分光光度計的構造及使用 73
第七章 電泳技術 76
第一節(jié) 電泳技術的原理 76
第二節(jié) 電泳技術的類型 78
第三節(jié) 電泳常用的染色方法 88
第八章 蛋白質印跡技術 91
第三篇 實驗項目
第九章 基礎實驗項目 97
實驗一 蛋白質及氨基酸的呈色反應 97
實驗二 酪蛋白的制備 100
實驗三 蛋白質的沉淀作用和等電點測定 102
實驗四 蛋白質透析法脫鹽 105
實驗五 氨基酸的紙層析分離 106
實驗六 分子篩層析法脫鹽 108
實驗七 分子篩層析法分離純化蛋白質及分子質量的測定110
實驗八 Folin-酚試劑法測定蛋白質濃度114
實驗九 紫外吸收法測定蛋白質濃度116
實驗十 考馬斯亮藍染色法測定蛋白質濃度117
實驗十一 醋酸纖維素膜電泳分離血清蛋白119
實驗十二 聚丙烯酰胺凝膠電泳分離卵清蛋白 122
實驗十三 不連續(xù)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白質的分子質量 125
實驗十四 唾液淀粉酶的動力學性質 127
實驗十五 胰蛋白酶的制備及酶活力測定 130
實驗十六 溫度、pH對糖化酶活力的影響 133
實驗十七 果蔬中維生素C的定量測定（2,6-二氯酚靛酚滴定法） 136
實驗十八 熒光光度法定量測定核黃素（維生素B2） 139
實驗十九 DEAE-纖維素薄層層析分離鑒定核苷酸 141
實驗二十 植物基因組DNA的提取 143
實驗二十一 PCR擴增小麥持家基因Rubisco 145
實驗二十二 瓊脂糖凝膠電泳分離DNA片段 147
實驗二十三 還原糖的提取及含量測定 148
實驗二十四 糖酵解中間產物的測定 150
實驗二十五 脂肪酸氧化——酮體的生成 152
實驗二十六 細胞活力和細胞凋亡檢測 154
第十章 綜合性實驗項目 156
綜合性實驗一 凱氏定氮法測定牛奶的蛋白質含量 156
綜合性實驗二 大蒜超氧化物歧化酶的提取、純化及性質測定 166
綜合性實驗三 雞卵類黏蛋白的分離純化、活性及分子質量測定 173
綜合性實驗四 動物組織轉氨酶的提取及活力測定 182
綜合性實驗五 酵母蔗糖酶的提取、純化及酶學性質研究 187
綜合性實驗六 植物過氧化物酶的提取及同工酶鑒定 195
綜合性實驗七 蛋白質印跡檢測重組大腸桿菌絲氨酸羥甲基轉移酶 198
綜合性實驗八 酵母RNA的提取、鑒定及定量測定 202
綜合性實驗九 兔肝組織總RNA的提取及RT-PCR 208
綜合性實驗十 兔肝組織DNA的提取及定量測定 213
綜合性實驗十一 質粒載體構建與藍白斑篩選 217
綜合性實驗十二 大豆多糖的提取、單糖組成及抗氧化活性測定 220
綜合性實驗十三 輔酶 Q10的超臨界流體萃取與 HPLC分離 225
參考文獻 231
附錄一 常用標準溶液的配制和標定 232
附錄二 常用緩沖液的配制方法 236
附錄三 硫酸銨飽和度的調整用表 241
附錄四 柱層析材料 243