李修平,女,1981年12月生,漢族,碩士,現(xiàn)任職于佳木斯大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院從事教學(xué)研究,主要研究方向:基因工程技術(shù)方法及其典型應(yīng)用。教學(xué)經(jīng)驗(yàn)豐富,科研成果豐碩,已發(fā)表學(xué)術(shù)科研論文多篇。
第1章 引言
1.1 基因工程的概念
1.2 基因工程的研究?jī)?nèi)容
1.2.1 基因克隆工具的研究
1.2.2 基因克隆技術(shù)的研究
1.2.3 克隆對(duì)象——目的基因的研究
1.2.4 基因工程產(chǎn)品的研究
1.3 基因工程的研究意義
1.3.1 創(chuàng)造出新的生物類型
1.3.2 按意愿進(jìn)行設(shè)計(jì)和控制
1.3.3 推動(dòng)著生物學(xué)與醫(yī)學(xué)研究的發(fā)展
1.3.4 蘊(yùn)藏著巨大的潛在生產(chǎn)力
1.4 基因工程的安全性研究
第2章 基因工程的工具酶與克隆載體
2.1 基因工程的工具酶
2.1.1 基因工程常用的工具酶
2.1.2 限制性內(nèi)切核酸酶
2.1.3 DNA連接酶
2.1.4 DNA聚合酶
2.1.5 末端轉(zhuǎn)移酶
2.1.6 T4多聚核苷酸激酶
2.1.7 堿性磷酸酶
2.1.8 S1核酸酶
2.1.9 Bal31核酸酶
2.1.10 外切核酸酶
2.2 基因工程的克隆載體
2.2.1 質(zhì)粒栽體
2.2.2 噬茵體載體
2.2.3 噬茵粒載體
2.2.4 柯斯質(zhì)粒栽體
2.2.5 人工染色體載體
2.2.6 病毒表達(dá)載體
2.2.7 反轉(zhuǎn)錄病毒載體
第3章 基因工程中的典型技術(shù)研究
3.1 核酸的提取與純化
3.1.1 DNA的提取與純化
3.1.2 RNA的提取與純化
3.2 凝膠電泳技術(shù)
3.2.1 DNA凝膠電泳
3.2.2 脈沖場(chǎng)凝膠電泳
3.2.3 蛋白質(zhì)雙向凝膠電泳
3.2.4 變性梯度凝膠電泳
3.3 分子雜交技術(shù)
3.3.1 核酸探針
3.3.2 Southern印跡雜交
3.3.3 Northern印跡雜交
3.3.4 菌落(或噬菌斑)印跡雜交
3.3.5 斑點(diǎn)印跡雜交和狹線印跡雜交
3.4 PCR技術(shù)
3.4.1 PCR技術(shù)的基本原理
3.4.2 PCR反應(yīng)體系
3.4.3 PCR反應(yīng)條件
3.4.4 PCR反應(yīng)的應(yīng)用模式
3.5 DNA序列分析
3.5.1 Maxam-Gilbert化學(xué)降解法
3.5.2 Sanger雙脫氧鏈終止法
3.5.3 DNA的自動(dòng)化測(cè)序
3.5.4 新一代測(cè)序技術(shù)
3.6 研究蛋白質(zhì)與DNA相互作用的方法
3.6.1 酵母雙雜交系統(tǒng)
3.6.2 酵母單雜交系統(tǒng)
3.6.3 凝膠阻滯試驗(yàn)
3.6.4 DNaseI足跡試驗(yàn)
3.6.5 甲基化干擾試驗(yàn)
第4章 目的基因的獲取途徑分析
4.1 化學(xué)合成法獲得目的基因
4.1.1 寡核苷酸化學(xué)合成
4.1.2 基因的半合成(酶促合成)
4.1.3 短片段直接連接法組裝DNA
4.2 篩選基因文庫(kù)獲取目的基因
4.2.1 基因組文庫(kù)的構(gòu)建與篩選
4.2.2 cDNA文庫(kù)的構(gòu)建與篩選
4.3 圖位克隆獲得目的基因
4.3.1 染色體步移法篩選目的基因
4.3.2 染色體登陸法篩選目的基因
4.4 轉(zhuǎn)座子標(biāo)簽法獲得目的基因
4.5 根據(jù)基因差異表達(dá)獲得目的基因
4.5.1 mRNA差異顯示技術(shù)
4.5.2 抑制性差減雜交技術(shù)
第5章 外源基因的表達(dá)
5.1 外源基因在原核細(xì)胞中的表達(dá)
5.1.1 原核生物基因表達(dá)載體
5.1.2 原核表達(dá)的受體系統(tǒng)
5.2 外源基因在真核細(xì)胞中的表達(dá)
5.2.1 酵母表達(dá)系統(tǒng)
5.2.2 昆蟲(chóng)細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)
5.2.3 哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)
第6章 轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物
6.1 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物
6.1.1 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的概念
6.1.2 外源基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞的方法
6.1.3 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的檢測(cè)
6.1.4 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的應(yīng)用
6.2 轉(zhuǎn)基因植物
6.2.1 外源基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法
6.2.2 轉(zhuǎn)基因植物的篩選與檢測(cè)
6.2.3 轉(zhuǎn)基因植物的應(yīng)用
第7章 基因治療
7.1 基因治療概述
7.1.1 基因治療的定義
7.1.2 基因治療的基本程序
7.2 基因的轉(zhuǎn)移載體
7.2.1 病毒載體
7.2.2 非病毒載體
7.3 基因治療的應(yīng)用
7.3.1 遺傳病的基因治療
7.3.2 腫瘤的基因治療
7.3.3 艾滋病的基因治療
參考文獻(xiàn)